INTRODUCCIÓN

La miel de Apis mellifera (miel de abeja) es el único producto natural endulzante que puede ser almacenado y usado tal cual es producido en la naturaleza, no requiere procesamiento o purificación^1),(2. En el transcurso de la historia su uso fue exclusivamente con fines religiosos o medicinales, posteriormente los griegos y romanos lo incorporaron como ingrediente a su dieta^2),(3. En su composición los carbohidratos constituyen el 80,0% de su peso seco y varían según la clase de miel: fructosa 28,0 a 44,0%; glucosa 22,0 a 38,0%; sacarosa 0,2 a 5,0%; maltosa 2,0 a 16,0%; otros azucares 0,1 a 8,0%; proteínas y aminoácidos 0,2 a 2,0%; vitaminas, minerales y metabolitos secundarios^4)-(6. Asimismo, presenta actividad antimicrobiana, antioxidante, antiinflamatoria y otras funciones bioquímicas y farmacológicas^1),(7),(8.

El agar OF (Basal Medium acc. To Hugh and Leifson, Merck), usado como gold stándar contiene peptona de caseína, cloruro de sodio, fosfato dipotásico, hidrato de carbono, agar-agar, agua destilada e indicador de pH como el Azul de Bromotimol^9)-(11 empleado para clasificar y diferenciar microorganismos gram-negativos en base al metabolismo fermentativo y oxidativo de los carbohidratos^12),(13. Las bacterias sacarolíticas degradan el hidrato de carbono, ya sea por fermentación o por oxidación¹⁴; la fermentación es un proceso anaeróbico que requiere la fosforilación inicial, utiliza las vías de la Glucólisis (Embden-Meyerhof-Parnas) y de las pentosas fosfato y Entner-Doudorof, y la oxidación de la glucosa produce ácido pirúvico por una vía de derivación (Shunt) en condiciones estrictamente aeróbicas y no requiere de fosforilación inicial^15)-(18.

Se realizó un estudio experimental, analítico y transversal, el cual estuvo orientado a evaluar si el uso del agar miel de Apis mellífera permite diferenciar bacterias oxidativas y fermentadoras, comparadas con el agar OF. Las bacterias oxidativas producen ácidos solo en el tubo de ensayo expuesto al oxígeno atmosférico; las bacterias fermentadoras producen ácidos en tubo de ensayo expuesto al oxígeno y en tubo sellado sin exposición a oxígeno; asimismo, las bacterias no sacarolíticas son inertes en este medio con pH alcalino después de la incubación^{10),(11),(15),(17}. Por tal motivo, se diseñó un método analítico in vitro en base a miel de abeja para la diferenciación de bacterias oxidativas y fermentadoras, tomando de base las técnicas sustentadas en investigaciones nacionales e internacionales, garantizando la confiabilidad de los datos obtenidos^{7),(10),(16),(18),(19}.

MÉTODOS

RESULTADOS

DISCUSIÓN

Los países de Sudamérica presentan por sus características geográficas y su diversidad de climas una gran variedad de flora natural y cultivada (multifloral) la cual brinda posibilidades tecnológicas para la apicultura rentable y sostenible²³. La clasificación de la miel de abeja es variada y su composición química depende de factores geográficos, fuentes botánicas, condiciones climáticas, entre otros^1)-(3),(24. En la Comunidad de Pargay, distrito de Chuquibambilla, provincia de Grau, departamento y región de Apurímac, en Perú; se cultivan diferentes especies de plantas medicinales; por tal motivo en la miel de abeja se identificaron metabolitos secundarios como compuestos fenólicos, alcaloides, triperpenoides y glicósidos cardiotónicos; los cuales probablemente ejercen efectos en el desarrollo bacteriano^5),(25.

Diversos estudios^2),(4)-(6) indican que la miel de abeja debido a su elevado contenido en azúcares simples su asimilación digestiva es rápida, altamente calórica por lo cual resulta útil como fuente de energía, además de contener calcio, cobre, magnesio, manganeso zinc, fósforo y vitaminas principalmente vitamina A, D, E, C, B6, B12 y E; asimismo, otros estudios^2),(28) señalan la presencia de aminoácidos, proteínas, ácidos orgánicos. Es por ello que la miel de abeja, al presentar una composición de bioelementos primarios, secundarios y oligoelementos permite que las cepas bacterianas en estudio puedan desarrollarse en el agar con miel.

Al realizar la lectura de los medios de cultivo, el 100% de agares preparados con miel de abeja para el desarrollo de las cepas de Escherichia coli ATCC 25922 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 29212 resultaron con el calificativo de Bueno en los dos criterios de evaluación; comparado con el agar OF (Basal Medium acc. To Hugh and Leifson). Estudios previos sobre la miel de abeja describen actividad antibacteriana a diferentes concentraciones según ubicación geográfica de la colecta^1),(25)-(29; motivo por el cual se evaluó la actividad antibacteriana de la miel de abeja a concentraciones de 5% y 10% en el agar con miel de abeja para el crecimiento de las cepas descritas anteriormente, y se obtuvo como resultado el efecto no inhibitorio del crecimiento; esto se debe a que durante el proceso de elaboración del agar con miel de abeja fue sometido al proceso de esterilización en autoclave a 121ºC por 15 minutos a 15 libras de presión^13)-(15.

Según diversos autores^30)-(33; son conocidas las propiedades físicas de los carbohidratos como el punto de fusión de D(+)Glucosa a 146ºC; D(-)Fructosa a 103ºC; D(+)Sacarosa a 184ºC y punto de ebullición de la D(+)Maltosa a 102ºC, considerando ello y de acuerdo al experimento las estructuras químicas de la glucosa y sacarosa posiblemente no sufrieron cambios después del proceso de esterilización, lo cual se corrobora a las 24 horas de incubación, donde se aprecia el viraje del indicador de pH, lo cual confirma el metabolismo oxidativo o fermentador de las cepas en estudio.

CONCLUSIÓN

En condiciones experimentales el uso del agar con miel de Apis mellifera (miel de abeja) ha evidenciado ser bueno como alternativa al agar OF (Basal Medium acc. To Hugh and Leifson) para diferenciar Escherichia coli ATCC 25922 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 29212 como oxidantes y fermentadoras de carbohidratos.