Abstract

FARRIOL, M.; VENEREO, Y.; ORTA, X.  and  RODRIGUEZ, R.. Validación del modelo in vitro de la nutrición usando una fórmula de enteral en neutrófilos envejecidos. Nutr. Hosp. [online]. 2003, vol.18, n.4, pp.194-198. ISSN 1699-5198.

El objetivo del estudio ha sido validar un modelo en cultivo celular, apropiado para valorar los efectos in vitro de las fórmulas estándar y completas de nutrición enteral en la funcionalidad de los neutrófilos. El modelo consiste en células envejecidas a las que se añade una fórmula comercial de nutrición enteral que contiene LCT como fuente de lípidos. En experimentos preliminares se determinó la dosis de la fórmula y el intervalo de tiempo del cultivo. Los neutrófilos se aislaron a partir de un pool de sangre procedente de sujetos voluntarios sanos (18 a 55 años) y fueron cultivados sin y con la adición de la fórmula comercial enteral que contiene un 3,5% de lípidos con una concentración intraensayo equivalente a 0,04, 0,08, 0,2 y 0,4 mM de LCT durante 18, 42 o 76 horas. En base a los resultados de viabilidad celular obtenidos se establecieron como adecuados unas concentraciones de 0,2, 0,4 mM y un tiempo de cultivo de 18 horas en posteriores experimentos. La funcionalidad de los neutrófilos se evaluó mediante la fagocitosis (test del NBT), producción de malonildialdehído (MDA) como índice de lipoperoxidación y la fragmentación del ADN. Por microscopia óptica se observó que la adición de una dosis 0,4 mM de LCT (p < 0,05) producía porcentajes elevados de células preapoptóticas y un incremento significativo en la fragmentación del ADN al comparar con los controles sin adición. En cambio, cultivos con adición de 0,2 y 0,4 mM de LCT mostraron un descenso significativo en la producción de malonildialdehído. Este modelo de nutrición in vitro en neutrófilos y con una dieta comercial enteral completa es de relativamente fácil ejecución y puede aplicarse a diferentes condiciones patológicas en las que se estudien los cambios en la funcionalidad de los neutrófilos.

Keywords : Enteral; Envejecimiento; Modelo; Neutrófilos; Nutrición.

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