Resumo

PARK, Jeong Eun; SCHLEGEL, Hans-Günter; RHIE, Ho Gun  e  LEE, Ho Sa. Secuencia nucleotídica y expresión del determinante ncr de resistencia a níquel y cobalto en Hafnia alvei 5-5. INT. MICROBIOL. [online]. 2004, vol.7, n.1, pp.27-34. ISSN 1139-6709.

Los genes estructurales de la resistencia a níquel y cobalto del plásmido conjugativo pEJH 501 de Hafnia alvei 5-5, contenido en un fragmento SalI-EcoRI de 4,8 kb, fueron clonados y secuenciados. La secuencia de DNA incluye cinco genes en el siguiente orden: ncrA, ncrB, ncrC, ncrY, y ncrX. Las secuencias de aminoácidos equivalentes a ncrA fueron homólogas a las secuencias de aminoácidos codificadas por nreB en Achromobacter xylosoxidans 31A. La expresión de los genes ncr mediante el sistema promotor de la RNA polimerasa T7 permite a Escherichia coli BL21 (DE3) sobreexpresar NcrA, NcrB, y NcrC, pero no NcrY ni NcrX. Los pesos moleculares aparentes de NcrA, NcrB y NcrC fueron 30, 33, y 17 kDa, respectivamente. El análisis de extensión de los cebadores mostró que el mRNA de ncr se iniciaba a una distancia de 23 nucleótidos corriente arriba del ncrA. La región promotora del operón ncr posee una fuerte secuencia promotora de tipo ð³² en la posición -35, y estudios transcripcionales de fusión con ´lacZ indicaron que el elemento situado en -35 influye sobre la transcripción específica de ð³².

Palavras-chave : plásmido pEJH501; operón NcrABCYX; secuencia promotora de tipo ð³²; bacterias resistentes a níquel.

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