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Sanidad Militar

versión impresa ISSN 1887-8571

Resumen

MONTENEGRO ALVAREZ DE TEJERA, P. et al. Desarrollo y validación de un método para la determinación simultanea de pseudouridina y creatinina en orina humana: Evaluación del índice pseudouridona/creatinina en fumadores y no fumadores. Sanid. Mil. [online]. 2012, vol.68, n.1, pp.22-26. ISSN 1887-8571.  http://dx.doi.org/10.4321/S1887-85712012000100004.

Introducción: La excreción de pseudouridina, está incrementada en procesos inflamatorios relacionados con pérdida de masa muscular encontrada en pacientes con afectación pulmonar. Material y Métodos: Se desarrolla y valida, un método, mediante HPLC, para la determinación simultanea de pseudouridina y creatinina en orina. Como fase estacionaria se utilizó una columna LiCHrospher® 100 RP-18 (5 μm) LiCHroCART® 250-4 (Merck). Fase móvil consistente en un tampón fosfato 0,01 M (pH = 6,1) conteniendo octanosulfónico 3mmol como agente de par iónico, y longitud de onda de 250 nm. La preparación de la muestra se basa en una dilución y filtración. La linealidad del método fue satisfactoria dentro del rango de concentración de 0,23-22,5 nmol/ml para pseudouridina y 1,45-1100 nmol/ml para creatinina, con límites de cuantificación de 0,175 y 8,59 nmol/ml, respectivamente. Resultados: La recuperación media fue del 95,55% para Pseudouridina y del 97,82% para Creatinina en la validación de adición de estándar interno y de 93,16 y 89,79% en la de dilución. Los coeficientes de variación fueron < del 8% en todos los niveles. Se encontró una correlación entre los valores encontrados y los esperados (coeficiente de correlación de Pearson de 0,99). Conclusiones: Existe correlación entre las recuperaciones de pesudouridina y creatinina, coeficiente de correlación de Pearson de 0,86. El método desarrollado, es rápido, sensible y selectivo para la simultanea determinación de pseudouridina y creatinina en orina humana. En este estudio preliminar con 30 voluntarios sanos, 18 no fumadores y 12 fumadores, no se han encontrado diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos con respecto a la excreción de pseudouridina.

Palabras clave : Pseudouridina; Creatinina; Validación; RP-HPLC; Cromatografía.

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