NOTA BREVE

 

Fertilidade de carneiros de raça Saloia com sémen refrigerado ou congelado

Fertility of Saloia rams using refrigerated or frozen semen

 

 

Barbas, J.^{1 *}; Marques, C.¹; Baptista, M.¹; Mascarenhas, R.¹; Pereira, R.¹; Cavaco-Gonçalves, S.¹; Vasques, M.¹ e Horta, A.¹

UEBRG. L-INIA. INIAV. Vale de Santarém. Portugal. ^*jpbarbas@gmail.com

 

 

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RESUMO

Avaliaram-se as fertilidades e coeficientes de variação (CV) de carneiros Saloios após inseminação artificial (IA) por via cervical com sémen refrigerado (SR) ou congelado (SC). Na 1^a experiência avaliou-se o efeito de duas épocas de IA (primavera vs. outono) sobre a fertilidade, utilizando SR (n=5 carneiros) e de duas épocas de congelação de sémen (outono vs. inverno) sobre a fertilidade de ovelhas inseminadas na primavera utilizando SC (n=3 carneiros). Nas outras experiências avaliaram-se as variações da fertilidade de carneiros, independentemente das épocas de IA ou congelação, utilizando SR e SC (2^a experiência: 4 carneiros comuns; 3^a experiência: 16 e 5 carneiros, respectivamente). Não foram observadas diferenças na fertilidade entre épocas de IA ou congelação de sémen. As fertilidades obtidas com SR foram superiores às do SC (2^a experiência: 51,28 vs. 13,65 %; 3^a experiência: 48,51 vs. 13,04 %). Os CV da fertilidade utilizando SC foram superiores aos do SR (2^a experiência: 41,3 % vs. 13,1 %; 3^a experiência: 38,9 vs. 19,5 %). Os carneiros de raça Saloia podem ser utilizados em programas de IA com SR e SC nas épocas do ano estudadas sem diminuição da fertilidade. O SC originou CV para a fertilidade superior sugerindo diferentes susceptibilidades dos carneiros à congelação.

Palavras chave: Inseminação artificial.

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SUMMARY

We intend to estimate Saloia breed rams fertility and its variation coefficients (VC) after cervical artificial insemination (AI) with refrigerated (SR) or frozen semen (SC). In experiment 1, we studied the seasonal effect of AI (spring vs. autumn) on fertility (n=5 rams) using SR. The seasonal effect of semen freezing (autumn vs. winter, n=3 rams) on fertility of ewes inseminated in spring was also tested with SC. Variations in ram fertility using either SF or SC were determined independently of seasons of insemination and freezing (experiment 2: SF (n=4), SC (n=4), same rams; experiment 3: SF=16, FS=5 rams). No seasonal differences in fertility were found when ewes were inseminated either with SF or SC. Fertility was higher when RS rather than SC was used (experiment 2: 51.28 vs. 13.65 %; experiment 3: 48.51 vs. 13.04 %, respectively). Fertility VCs from SC were higher than those from SR (experiment 2: 41.3 vs. 13.1 %; experiment 3: 38.9 vs. 19.5 %, respectively). SR or SC from Saloia rams can be used in AI programs during the studied seasons with no deleterious effect on fertility. Higher fertility VCs are estimated when insemination is performed with SR, suggesting semen individual susceptibility to freezing.

Key words: Artificial insemination.

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Introdução

A IA com SC por via cervical origina fertilidades baixas, devido às alterações que ocorrem nos espermatozóides (spz) durante o processo de congelação/descongelação, responsáveis por maiores dificuldades no trânsito espermático, diminuição da capacidade fertilizante e aumento da mortalidade embrionária (Álvarez et al., 2012). Os primeiros resultados obtidos após IA com sémen congelado (SC) originaram uma fertilidade de 17,3 % comparativamente a 40 % em animais do mesmo efectivo inseminadas com SR (Barbas et al., 2003). O objectivo deste trabalho foi avaliar as variações de fertilidade e os coeficientes de variação (CV) em carneiros utilizados na produção de SR ou SC, independentemente das épocas de IA e de congelação do sémen. Paralelamente, comparou-se o efeito da época de IA (primavera vs. outono) quando utilizado SR e o efeito da época de congelação (outono vs. inverno), nas ovelhas inseminadas durante a primavera.

 

Material e métodos

Neste trabalho foram utilizados carneiros (n=16) e ovelhas multíparas (n=200) da raça Saloia. O sémen foi recolhido pelo método da vagina artificial sendo avaliados o volume, as mobilidades massal (MM), individual (MI, %), concentração (10⁶ spz /mL), e no SC, a MI %, e as % de spz vivos e normais. As avaliações foram efectuadas segundo Rodriguez-Martinez (2003). Os ejaculados com uma MM ≤ 3 e MI ≤ 65 % foram rejeitados. O sémen destinado a ser refrigerado foi diluído com um diluidor à base de leite de vaca desnatado (0,11 g/mL), até obter uma concentração de 1600 × 10⁶ de spz/mL. As palhinhas foram refrigeradas gradualmente até 15 ^oC. O sémen para congelar foi diluído a 30 ^oC numa só etapa, utilizando um diluidor de congelação adaptado de Evans e Maxwell (1990) de modo a obter uma concentração de 1200 × 10⁶ de spz/mL 1. O sémen foi refrigerado até aos 4 ^oC durante 4 horas. Depois, as palhinhas foram congeladas em vapores de azoto líquido durante 20 minutos. Só o SC com MI ≥ 40 % e ≤ 35 % de formas anormais foi utilizado na IA. No momento da retirada das esponjas vaginais foram administradas 500 UI de eCG. As IA foram realizadas por via cervical, sem prévia detecção do estro, cerca de 54 ± 1 horas após a remoção das esponjas com SR, na primavera e no outono e, com SC (outono e inverno) apenas na primavera. O intervalo médio entre a recolha de sémen e a IA com SR foi de 2,5-4 horas. Nas IA com SC, cada ovelha foi inseminada com duas doses de sémen. A avaliação reprodutiva dos carneiros utilizados na IA foi determinada individualmente e expressa através da fertilidade. Foi também calculado o CV da fertilidade. No delineamento experimental os dados foram tratados segundo três experiências. A 1^a, teve como objectivo avaliar a interacção época de IA (primavera e outono) x carneiro (n=5) na fertilidade utilizando SR. Foram efectuadas 302 IA na primavera e 67 IA no outono, totalizando 369 IA. Na avaliação das fertilidades obtidas nas duas épocas de IA foi utilizado o teste do χ², a análise de variância multivariada factorial (epoca de IA x carneiro) e o teste de Fisher. Foi avaliada a interacção época de congelação do sémen (outono e inverno) x carneiro (n=3) para a fertilidade. As IA (n=364) foram realizadas em maio com SC no outono (n=144) e no inverno (n=220). Na 2^a experiência avaliaram-se as variações da fertilidade utilizando SR ou SC. Foram utilizados 4 carneiros na produção de SR e SC que por facilidade de apresentação designaremos por carneiros comuns. Foram realizadas 172 IA com SR e 326 com SC, totalizando 498 IA. Na avaliação das fertilidades obtidas com SR e SC foi utilizada a análise de variância multivariada considerando os factores carneiro (n=4) e tipo de sémen (SR e SC) (Statsoft Inc, 1995). Os CV da fertilidade de cada carneiro, foram determinados a partir do registo reprodutivo de todas as ovelhas inseminadas por cada macho e seguidamente foram comparados por análise de variância entre os grupos SR e SC (n=4). Na 3^a experiência avaliaram-se as variações de fertilidade usando SR ou SC de todos os carneiros. Foram realizadas 1116 IA, sendo 696 realizadas com SR e 420 com SC.

 

Resultados

Os resultados da 1^a experiência nomeadamente as fertilidades obtidas com SR em duas épocas de IA, não revelaram diferenças significativas entre carneiros, épocas de IA, nem interacções significativas entre carneiros x épocas de IA. As fertilidades globais para os 5 carneiros nas épocas de primavera e no outono foram respectivamente 44,95 % e 36,46 %, obtendo-se uma fertilidade média de 40,7 %. As fertilidades com SC no outono e no inverno foram 15,03 e 13,17 %. Não havendo interacções significativas carneiro x época de IA (SR) e carneiro x época de congelação de sémen relativamente à fertilidade (1^a experiência), este parâmetro reprodutivo foi avaliado em 4 carneiros comuns (dadores de SR e SC), independentemente da época de IA (SR) e época de congelação de sémen (SC) (2^a experiência). Nesta experiência as fertilidades obtidas com SR (51,28 %) foram superiores às obtidas com SC (13,65 %) (tabela I). Não foram observadas variações individuais na fertilidade utilizando SR (42,85-58,53 %) ou SC (6,66-20,13 %), mas os CV para a fertilidade utilizando SC (41,3 %) foram superiores (p<0,05) aos obtidos com SR (13,1 %) (tabela I). As fertilidades obtidas com todos os carneiros utilizados na IA com SR e com SC, independentemente das épocas de IA e das épocas de congelação de sémen (3^a experiência), confirmam os resultados da 2^a experiência. De igual modo, as fertilidades obtidas com SR (48,51) foram superiores às obtidas com SC (13,04 %) (tabela II). Não foram observadas variações individuais significativas na fertilidade utilizando SR (28,57-63,15 %) ou congelado (6,66-20,13 %). Os CV para a fertilidade utilizando SC (38,9 %) foram superiores aos determinados com SR (19,5 %) (tabela II).

 

 

Discussão

Neste trabalho utilizando SR de 16 carneiros foi obtida uma fertilidade média de 48,51 % em ovelhas Saloias (n=696) inseminadas na primavera e no outono. Não observámos variações de fertilidade entre épocas do ano (primavera, 44,95 % vs. outono, 36,46 %) sendo possível a reprodução durante a primavera sem prejuízo da fertilidade. Não foram observadas variações significativas na fertilidade dos 16 carneiros utilizados na IA com SR, com valores compreendidos entre 28,6 e 63,2 %, registando-se um CV de 19,5 %. Não houve um efeito da época de congelação do sémen sobre a fertilidade (outono, 15,03 % vs. inverno, 13,17 %) nem variações individuais utilizando o SC (6,7 a 20,1 %), determinando-se um CV de 38,9 %, que foi superior ao observado com SR (19,5 %), sugerindo diferentes aptidões à congelação/descongelação do sémen entre os carneiros de raça Saloia. As fertilidades obtidas após IA com SC foram influenciadas pela raça, carneiro e época de congelação do sémen. Recentemente ouve um aumento (p<0,01) da fertilidade (42,9 vs. 64,4 %) através da deposição vaginal de um análogo da prostaglandina E1, 6 horas antes do momento da IA com SR (p<0,13) com SC (23,3 vs. 32,5 %) (Barbas et al., 2013). A IA com SC originou uma diminuição significativa da fertilidade sendo o decréscimo de fertilidade atribuído a vários factores nomeadamente a duração da capacidade fertilizante (Morrier e Bailey, 2012), a proporção de spz móveis e respectiva aptidão para ultrapassar o cérvix ovino (Richardson et al., 2012).

 

Conclusões

Os carneiros de raça Saloia podem ser utilizados em programas de IA com SR ou SC nas épocas do ano estudadas sem decréscimo da fertilidade. A congelação do sémen dos carneiros da raça Saloia origina uma diminuição significativa da fertilidade de-terminado-se um aumento significativo do respectivo CV. Não foram observadas variações individuais significativas na qualidade do SC e na fertilidade dos carneiros após IA com SC. O elevado CV da fertilidade utilizando SC sugere diferentes susceptibilidades entre carneiros na aptidão à congelação/descongelação dos respectivos ejaculados.

 

Bibliografia

1. Álvarez, M.; Chamorro, C.; Kaabi, M.; Anel-Lopez, L.; Boixo, J.; Anel, E.; Anel, L. and De Paz,P. 2012. Design and in vivo evaluation of two adapted catheters for intrauterine transcervical insemination in sheep. Anim Reprod Sci, 131: 153-159.         [ Links ]

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Recibido: 23-7-12.
Aceptado: 31-10-12.