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Empleo de bacteriófagos frente a Salmonella enteritidis como herramienta de prevención

Use of bacteriphages against Salmonella enteritidis: a prevention tool

 

 

Cristina García¹, Clara Marín², Pablo Catalá-Gregori¹ y Jose Miguel Soriano³

¹Centro de Calidad Avícola y Alimentación Animal de la Comunidad Valenciana CECAV, Alquerías del Niño Perdido, Castellón.
²Facultad de Veterinaria. Departamento de Producción y Sanidad Animal, Salud Pública Veterinaria y Ciencia y Tecnología de los Alimentos, Universidad CEU Cardenal Herrera (Moncada), Valencia.
³Unidad Mixta de Investigación en Endocrinología, Nutrición y Dietética Clínica. Universitat de València- Instituto de Investigación Sanitaria La Fe (Valencia), España.

 

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RESUMEN

Introducción: la salmonelosis es una enfermedad de alta prevalencia, siendo la búsqueda de herramientas preventivas para evitar la contaminación una prioridad a nivel de salud pública.
Objetivo: en el presente trabajo se evaluó el efecto in vitro de bacteriófagos frente a Salmonella enteritidis como una herramienta de prevención.
Método: se realizaron dos pruebas con tres concentraciones de bacteriófagos frente a dos cepas de Salmonella enteritidis inoculadas en muestras de heces frescas de gallinas ponedoras, y el correspondiente control positivo. Así, se testaron cuatro grupos en cada una de las dos pruebas. Cada grupo experimental contó con dos réplicas, y en cada réplica se incubaron tres placas. Las concentraciones ensayadas fueron tres: solución comercial (5 × 10⁷ pfu/mL), y dos diluciones de la misma (1/10 y 1/30). Una de las cepas testada fue la cepa CECT 4300, cepa certificada de la Colección Española de Cultivo Tipo, y la otra una cepa de campo aislada en una explotación de ponedoras sacrificadas. Ambas cepas se inocularon en muestras de heces a la dosis de 1,3 × 10⁵ ufc/g de heces en cada uno de los cuatro grupos. Se procedió con el aislamiento e identificación de la bacteria por ISO 6579 a varios tiempos desde la inoculación: 1 minuto, 24 h y 7 días.
Resultados: en la primera prueba, con la cepa certificada, se aisló Salmonella en todos los grupos a tiempo 1 minuto. A las 24 h se aisló Salmonella en todos los grupos excepto en una de las réplicas tratada con la dilución 1/10 de bacteriófagos, en una de las placas de la otra réplica tratada con la dilución 1/10, y en dos placas de cada una de las dos réplicas tratadas con la solución comercial. A partir de los 7 días ya no se aisló la bacteria de ninguno de los grupos experimentales. En la segunda prueba, con la cepa de campo, se aisló Salmonella en todos los grupos a tiempo 1 minuto. A las 24 h se aisló Salmonella en todos los grupos excepto en una de las réplicas tratada con la dilución 1/10 de bacteriófagos y en las dos réplicas tratadas con la solución comercial. Al igual que en la prueba primera, a los 7 días tampoco se aisló Salmonella en ninguno de los grupos experimentales.
Conclusiones: el empleo de bacteriófagos contribuyó a reducir los aislamientos de Salmonella enteritidis en las muestras de heces a las 24 h de su aplicación, por lo que podría ser considerado una herramienta de prevención. A los 7 días tras la inoculación de la bacteria no se aisló la misma en ninguno de los grupos experimentales.

Palabras clave: Bacteriófago. In-vitro. Salmonella enteritidis. ISO 6579.

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ABSTRACT

Introduction: salmonellosis is a highly prevalent disease still searching for preventive tools to avoid contamination level priority public health.
Objective: the in vitro effect of bacteriophages against Salmonella enteritidis was evaluated as a prevention tool.
Method: two tests with three concentrations of bacteriophages were conducted against two strains of Salmonella Enteritidis inoculated in fresh faeces of laying hens. Each test had a positive control. Thus, four groups in each test were evaluated. Each experimental group included two replicates, and three plates were incubated per replicate. The concentrations tested were three: commercial solution (5 × 10⁷ pfu/mL), and two dilutions (1/10 and 1/30). One of the strains tested was CECT 4300, a certified strain of Colección Española de Cultivo Tipo and the other a field isolated strain in a sacrificed hen farm. Both strains were inoculated at 1.3 × 10⁵ cfu/g of faeces in each of the four groups. Isolation and identification of bacteria by ISO6579 was done at various times after inoculation: 1 minute, 24 hours and 7 days.
Results: in the first test, with certified strain, Salmonella was isolated in all groups at time 1 minute. After 24 hours, Salmonella was isolated in all groups except in one of the replicas treated with 1/10 dilution of bacteriophages, one of the other replica plate treated with 1/10 dilution, and two plates of the two replicas treated with the commercial solution. After 7 days, the bacteria were not isolated from any of the experimental groups. In the second test, with the field strain, Salmonella was isolated in all groups at time 1 minute. After 24 hours, Salmonella was isolated in all groups except in one of the replicas treated with 1/10 dilution of bacteriophages and the two replicas treated with the commercial solution. Salmonella was not isolated in any of the experimental groups at 7 days.
Conclusions: the use of bacteriophages reduced Salmonella enteritidis isolates in faeces at 24 hours after the application, so it could be considered as a prevention tool. At 7 days after inoculation of bacteria, no one was isolated in any of the experimental groups.

Key words: Bacteriophage. In-vitro. Salmonella enteritidis. ISO6579.

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http://scielo.isciii.es/pdf/nh/v31n6/53originalotros07.pdf