ARTÍCULO ORIGINAL

 

Niveles intraoculares del factor derivado del epitelio pigmentario en pacientes con uveítis activa

Intraocular levels of pigment epithelium-derived factor in patients with active uveitis

 

 

C. Marín-Lambíes, D. Salom, S. García-Delpech y M. Díaz-Llopis

Departamento de Oftalmología, Hospital Universitario La Fe, Valencia, España

Dirección para correspondencia

 

 

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RESUMEN

Objetivo: El factor derivado del epitelio pigmentario (PEDF) es un factor antiangiogénico y neurotrófico que recientemente también ha demostrado tener poder antioxidante y antiinflamatorio. El objetivo de nuestro estudio fue determinar los niveles de PEDF en humor acuoso de ojos con uveítis anterior aguda idiopática (UAAI).
Métodos: Se realizó un estudio comparativo con grupo control. El humor acuoso fue estudiado en 20 ojos de 20 pacientes con UAAI. El grupo control comprendía 20 muestras de humor acuoso de 20 pacientes intervenidos de cataratas, sin ninguna otra enfermedad ocular ni sistémica. Los niveles de PEDF se determinaron mediante el test de ELISA.
Resultados: La concentración de PEDF en humor acuoso fue marcadamente superior en los pacientes con UAAI que en los sujetos control (test U Mann-Whitney, p<0,001). Los niveles de PEDF fueron 6.291.637,70±8.564.836,48 pg/ml (media±DS) en los ojos con UAAI y 449.178,10±158.670,19 pg/ml en los ojos del grupo control.
Conclusiones: Los niveles de PEDF en humor acuoso están aumentados en ojos con UAAI lo cual podría considerarse como un mecanismo de autoprotección frente a la inflamación.

Palabras clave: Uveítis. Factor derivado del epitelio pigmentario. Inflamación. Citocinas. Humor acuoso.

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ABSTRACT

Objective: Pigment epithelium-derived factor (PEDF) is an antiangiogenic/neurotrophic dual functional factor, and recently it was also shown to mediate antioxidative and anti-inflammatory action. The purpose of this study was to evaluate the levels of PEDF in the aqueous humor in eyes with idiopathic acute anterior uveitis (IAAU).
Methods: A comparative control study. Aqueous humor was collected from 20 eyes of 20 patients with IAAU. The control group included 20 aqueous humor samples from 20 patients who underwent a cataract surgery and without any other ocular or systemic diseases. Levels of PEDF were determined with the ELISA test.
Results: Concentration of PEDF in aqueous humor was remarkably higher in patients with IAAU than in control subjects (Mann-Whitney U test, P<.001). Levels of PEDF were 6,291,637.70±8,564,836.48 pg/ml (mean±SD) in eyes with IAAU and 449,178.10±158,670.19 pg/ml in the eyes of the control group.
Conclusion: The aqueous humor PEDF levels are increased in eyes with IAAU and may be increased as self-protection against inflammation.

Key words: Uveitis. Pigment epithelium-derived factor. Inflammation. Cytokines. Aqueous humor.

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Introducción

El factor derivado del epitelio pigmentario (PEDF) es una glucoproteína que pertenece a la superfamilia de los inhibidores de la serina proteasa, con gran actividad de diferenciación neuronal y que ha demostrado ser el más potente inhibidor de la angiogénesis¹. Inhibe el crecimiento y la migración de las células endoteliales de la retina y suprime la neovascularización retiniana inducida por isquemia². Además el PEDF reduce el estrés oxidativo y la producción de citocinas inflamatorias en la retina actuando como un factor antiinflamatorio endógeno³. Recientemente se ha demostrado que los niveles de PEDF en el humor acuoso de pacientes con uveítis son correlativos con marcadores inflamatorios tales como el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y la proteína quimioatractante de los monocitos 1 (MCP-1) y podrían estar elevados como un sistema de reacción frente a la inflamación en la uveítis^4,5. Sin embargo, el papel del PEDF en las enfermedades inflamatorias oculares como la uveítis aún no está suficientemente definido. En este estudio se valoran los niveles de PEDF en el humor acuoso de pacientes con uveítis anterior aguda idiopática (UAAI) y su posible implicación como mecanismo de autoprotección frente a la inflamación en el episodio agudo de las uveítis.

 

Sujetos, material y método

Estudio comparativo con grupo control. Se determinaron los niveles de PEDF en humor acuoso de pacientes con UAAI. El protocolo del estudio cumplía con la normativa de la Declaración de Helsinki y fue revisado y aprobado por el Comité Ético de nuestro centro hospitalario de atención terciaria. El consentimiento informado fue obtenido de cada paciente.

Se incluyeron pacientes de la unidad de Uveítis del Hospital Universitario La Fe de Valencia. Las muestras de humor acuoso fueron recogidas de 20 ojos de 20 pacientes con uveítis anteriores en episodio agudo. Todos estos pacientes fueron sometidos a un estudio oftalmológico completo, así como a una batería de pruebas de laboratorio con la finalidad de descartar otras posibles enfermedades oculares o sistémicas asociadas. Las muestras obtenidas como controles se obtuvieron de 20 ojos de 20 pacientes sanos en el momento de someterse a cirugía de cataratas.

Las muestras de humor acuoso de los pacientes con UAAI fueron recogidas bajo condiciones estériles usando la lámpara de hendidura y aplicando povidona yodada antes y después de la punción en cámara anterior con una aguja de 30 gauges. El humor acuoso de los controles fue obtenido con agujas de 30 gauges antes de iniciarse la cirugía de cataratas. En ambos grupos se empleó profilaxis antibiótica con colirio de ciprofloxacino, Oftacilox, Alcon (1 gota cada 8 horas) durante los 5 días siguientes a la extracción. Se recogieron muestras de al menos 0,05ml por cada paciente y se mantuvieron en tubos estériles, almacenándose inmediatamente a -80^oC hasta su examen.

Los niveles de PEDF fueron cuantificados mediante kits comerciales de ELISA (ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas) del humor acuoso (Searchlight Array; Pierce Biotechnology, Inc., Woburn, MA). Las características demográficas de los pacientes fueron estudiadas con el programa estadístico SPSS 13.0 para Windows (SPSS for Windows, SPSS Inc, Chicago, USA). Para comparar los niveles de PEDF en los grupos de estudio se aplicó el test U Mann-Whitney para muestras independientes, aceptándose p<0,05 como valor estadísticamente significativo.

 

Resultados

Se analizó un total de 20 muestras de humor acuoso de 20 pacientes con UAAI. La edad media±DS de este grupo fue de 47±3,2 años y el 30% eran mujeres. Del mismo modo se estudiaron 20 muestras de 20 pacientes que iban a ser operados de cataratas y que constituyeron el grupo control, con una edad media ± DS de 55±2,7 años. El 40% eran mujeres.

Los niveles de PEDF observados en los ojos con UAAI fueron de 6.291.637,70±8.564.836,48 pg/ml (media±DS) y de 449.178,10±158.670,19 pg/ml en los ojos del grupo control (Tabla 1). Estos resultados muestran como los niveles de PEDF difieren significativamente en los dos grupos observándose niveles marcadamente superiores en los pacientes con UAAI respecto a los pacientes control (Figura 1), siendo estos resultados estadísticamente significativos (test U Mann-Whitney, p<0.001). En la Tabla 2 se muestran los niveles detallados de PEDF en cada uno de los pacientes.

Figura 1. Niveles del factor derivado del epitelio pigmentario (PEDF)
en el humor acuoso de 20 ojos con uveítis anterior aguda idiopática (UAAI)
y 20 ojos control. Los niveles de PEDF fueron diferentes en ambos grupos,
siendo en los pacientes con UAAI significativamente mayores que en los
controles (test U Mann-Whitney p<0,001).

 

 

Discusión

El PEDF, que inicialmente se mostró como un potente inhibidor de la angiogénesis^1,2, ha demostrado que también tiene una importante acción antiinflamatoria³ y antioxidante^6,7. Sin embargo, estas acciones no están suficientemente clarificadas. Se ha reseñado que los niveles de PEDF en plasma están drásticamente disminuidos en uveítis experimentales inducidas en ratas, lo que indicaría que el PEDF podría funcionar como una proteína negativa de fase aguda y también que la disminución del PEDF por sí solo sería suficiente para inducir respuestas inflamatorias. El PEDF constituiría de esta manera un factor antiinflamatorio endógeno y niveles disminuidos a nivel ocular contribuirían a la inflamación e hiperpermeabilidad vascular.

Por otro lado, la inyección intravítrea de PEDF y su consiguiente aumento a nivel intraocular conduce a una disminución de la hiperpermeabilidad vascular y de la inflamación como consecuencia de una disminución de los niveles de factores inflamatorios como el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), proteína quimioatractante de los monocitos 1 (MCP-1), factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y molécula de adhesión intercelular 1 (ICAM-1), también en uveítis experimentales³.

Feher et al han demostrado que la administración retrobulbar de PEDF en ratas con queratouveítis inducidas por capsaicina, consiguió reducir la inflamación tanto en la cámara anterior como en la posterior, observando además que el efecto antiinflamatorio del PEDF es dosis-dependiente⁸.

Si los estudios sobre la acción antiinflamatoria del PEDF son abundantes en el modelo animal, los estudios en humanos son escasos. En 2007 Yoshida et al⁴ describen por primera vez niveles elevados de PEDF en humor acuoso de un grupo de pacientes con uveítis infecciosas y no infecciosas al compararlos con un grupo control. Igualmente señalan que las uveítis infecciosas muestran niveles significativamente más elevados de PEDF que las no infecciosas y que el PEDF aumenta en proporción a la actividad de la enfermedad. Para estos autores los niveles de PEDF en humor acuoso están correlacionados con marcadores inflamatorios como el TNF-α y la MCP-1 y consideran que el PEDF puede estar elevado como un sistema de reacción frente a la inflamación⁵. Del mismo modo, el PEDF se correlacionaría con factores antioxidantes endógenos, como la dimetil arginina asimétrica (ADMA), que igualmente se encuentran elevados en el humor acuoso de pacientes con uveítis^6,7.

En nuestro estudio, a pesar de las limitaciones del mismo, como son el número pequeño de la muestra y el elevado intervalo de confianza obtenido en el grupo de pacientes con UAAI, la determinación del PEDF nos ha permitido observar niveles significativamente elevados en un grupo homogéneo de pacientes con UAAI al compararlos con pacientes sanos, coincidiendo nuestros resultados con estudios previos realizados en uveítis de diferentes etiologías. Así pues, consideramos que la elevación del PEDF puede constituir una respuesta contra la inflamación actuando como un mecanismo de autoprotección frente a esta, independientemente de la etiología de las uveítis estudiadas.

 

Conflicto de intereses

Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

 

Bibliografía

1. Tombran-Tink J, Chader CG, Johnson LV. PEDF: pigment epithelium-derived factor with potent neuronal differentiative activity. Exp Eye Res. 1991; 53:411-4.         [ Links ]

2. Duh EJ, Yang HS, Suzuma I, Miyagi M, Youngman E, Mori K, et al. Pigment epithelium-derived factor suppresses ischemia-induced retinal neovascularization and VEGF-induced migration and growth. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2002; 43:821-9.         [ Links ]

3. Zhang SX, Wang JJ, Gao G, Shao C, Mott R, Ma JX. Pigment epithelium-derived factor (PEDF) is an endogenous anti-inflammatory factor. FASEB J. 2006; 20:323-5.         [ Links ]

4. Yoshida Y, Yamagishi S, Matsui T, Nakamura K, Imaizumi T, Yoshimura K, et al. Increased levels of pigment epithelium- derived factor in aqueous humor of patients with uveitis. Br J Ophthalmol. 2007; 91:149-50.         [ Links ]

5. Yoshida Y, Yamagishi S, Matsui T, Nakamura K, Imaizumi T, Yoshimura K, et al. Positive correlation between pigment epithelium-derived factor and monocyte chemoattractant protein-1 levels in the aqueous humour of patients with uveitis. Br J Ophthalmol. 2007; 91:737-8.         [ Links ]

6. Yoshida Y, Yamagishi S, Ueda S, Yoshimura K, Okuda S, Yamakawa R. Aqueous humour levels of asimetric dimethylarginine (ADMA) are correlated with pigment epithelium-derived factor (PEDF) in patients with uveitis. J Intern Med Res. 2007; 35:892-5.         [ Links ]

7. Yoshida Y, Yamagishi S, Matsui T, Nakamura K, Imaizumi T, Yoshimura K, et al. Positive correlation of pigment epithelium-derived factor and total antioxidant capacity in aqueous humour of patients with uveitis and proliferative diabetic retinopathy. Br J Ophthalmol. 2007; 91:1133-4.         [ Links ]

8. Feher J, Kovacs I, Pacella E, Keresz S, Spagnardi N, Balacco Gabrieli C. Pigment epithelium-derived factor (PEDF) attenuated capsaicin induced neurotrophic keratouveitis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009; 50:5173-80.         [ Links ]

 

 

Dirección para correspondencia:
crismarinlambies@hotmail.com
(C. Marín-Lambíes)

Recibido 12 Julio 2010
Aceptado 22 Diciembre 2010