Entamoeba gingivalis y Trichomonas tenax en pacientes diabéticos

Entamoeba gingivalis and Trichomonas tenax in diabetic patients

Nocito-Mendoza, Isabel* 
Vasconi-Correas, María Delia * 
Ponce de León-Horianski, Patricia *
Zdero-Pandzich, María**

*Jefe de Trabajos Prácticos del Area Parasitología. 
Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. 
Universidad Nacional de Rosario. Argentina 
** Profesora Adjunta del Area Parasitología. Dra. en Bioquímica. 
Especialidad Parasitología. Facultad de Ciencias Bioquímicas  y Farmacéuticas. 
Universidad Nacional de Rosario. Argentina. 

 

Correspondencia
Isabel Nocito Mendoza 
Area Parasitología 
Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas 
Suipacha 531 
2000 Rosario Argentina 
E-mail: nocitoi@yahoo.com.ar

 

Resumen: Objetivo: estudiar la frecuencia de Entamoeba gingivalis y Trichomonas tenax en pacientes diabéticos y la relación, de estos protozoarios, con IgA, pH y las periodontopatías. 
Material y método: se trabajó con 50 pacientes de ambos sexos, cuyas edades oscilaron entre 25 a 69 años, que concurrieron al servicio de Diagnóstico de la Facultad de Odontología de Rosario, Argentina. De cada paciente se obtuvo una muestra de placa y/o cálculo dental y una de saliva para la búsqueda de E. gingivalis y T. tenax por microscopía directa, cultivo y tinción tricrómica para E. gingivalis. En saliva se determinó también concentración de IgA y pH. Los resultados se analizaron estadísticamente.
Resultados: de los 50 pacientes estudiados, 37 (74%) presentaron parásitos. La prevalencia de E. gingivalis fue 91% y 32% para T. tenax. Los cultivos de T. tenax aumentaron significativamente la sensibilidad diagnótica. Sin embargo para E. gingivalis, ni el cultivo ni la coloración aumentaron la sensibilidad. Las determinaciones de IgA salival y pH, en la población de pacientes parasitados, mostraron que un elevado número de los mismos presentaron rangos de valores normales. La patología bucal predominante en los individuos que presentaron parásitos fue gingivitis. 
Conclusión: la presencia de parásitos no está asociada con ninguna de las tres variables. 

Palabras clave: Entamoeba gingivalis, Trichomonas tenax. 

Abstract: Objective: to study the frequency of Entamoeba gingivalis and Trichomonas tenax in diabetic patients and the relation between these protozoa and IgA, pH and periodontal pathologies. 
Material and Method: 50 patients, both sexes, whose eges varied between 25 and 69 were investigated. They had attended the Diagnosis Service of the Faculty of Odontology, Rosario, Argentina for consultation. A sample of dental plaque and/or tartar was obtained from each patient, plus a saliva sample, for the search of E. gingivalis and T. tenax, by direct optical microscopy and culture for both and trichromic stain for E. gingivalis. IgA and pH concentrations were also determined in saliva. Results were statistically analyzed. Results: out of the 50patiens studied, 37 (74%) presented parasites. The prevalence of E. gingivalis was 91%, while it was 32% for T. tenax. However, neither culture nor coloration increased E. gingivalis sensitivity. Salivary IgA and pH determinations in parasitized patients showed that many of these patients presented normal value ranges. Gingivitis was the predominant buccal pathology in parasitized individuals. 
Conclusion: the presence of parasites is not associated with any of the three variables. 

Key words: Entamoeba gingivalis, Trichomonas tenax. 

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        Fecha recepción: 11-07-2001        Fecha última revisión: 24-11-2002        Fecha aceptación: 07-01-2003 

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BIBLID [1138-123X(2003)8:1; enero-febrero 19-23] 

Nocito-Mendoza I, Vasconi-Correas MD, Ponce de León-Horianski P, Zdero-Pandzinch M. Entamoeba gingivalis y Trichomonas tenax en pacientes diabéticos. RCOE 2003;8(1):19-23 

 

Introducción 

La cavidad bucal del hombre es capaz de albergar a numerosos microorganismos que encuentran en ella nutrientes en abundancia¹. 

Dado que los síntomas odontoestomatológicos derivan de la interacción entre la microbiota patógena y los mecanismos de defensa del paciente aquejado por la enfermedad, es importante el estudio de los diferentes microorganismos considerados como patógenos en las periodontitis en adultos. Por lo pronto, junto a la predisposición, parecen desempeñar un papel de primer orden los factores locales irritantes, entre ellos la placa microbiana^2*. 

Los parásitos que colonizan la boca son raros, sin embargo Entamoeba gingivalis y Leishmania spp son dos protozoos asociados con abscesos bucales y lesiones mucocutaneas^3,4. Otros investigadores comunicaron infecciones helmínticas de la cavidad oral causadas por Cysticercus cellulosae⁵ y Trichinella spiralis⁶. 

Lange 1982⁷ y Hockec 1984⁸ han demostrado que existe una correlación positiva entre la presencia de los protozoos Entamoeba gingivalis y Trichomonas tenax con la profundidad de la bolsa, la higiene bucal y la microflora presente⁹. E. gingivalis fue la primera amoeba observada por Gross, (1849) en el cálculo dental del hombre¹⁰. 

La alta incidencia de E. gingivalis en individuos con periodontitis hace que muchos investigadores la consideren como uno de los agentes etiológicos de esta condición¹¹. Sin embargo como este protozoo también se presenta en la cavidad oral sana, otros autores creen que es un oportunista capaz de prosperar en el medio inducido por la enfermedad periodontal^12*. 

Los trofozoítos de E. gingivalis ingieren eritrocitos, leucocitos y núcleos¹; esto indicaría que pueden afectar la ecología oral y la formación de placa y contribuir a la lesión gingival pues podrían transportar activamente bacterias a la superficie celular o dentro de las vacuolas, cooperando en el progreso de la enfermedad periodontal^13,14. También elabora una proteína proteolítica que aumenta la patogénesis de la periodontitis. T. tenax fue aislada por Höffle (1850) en material extraído de boca y clasificada por Dobell (1939)¹⁰. T. tenax, considerado como un flagelado comensal, debe ser sometido a una revisión su patogenicidad, basada en la evidencia que presenta una fosfastasa ácida, una proteína de superficie semejante a la fibronectina que interviene en los mecanismos de adhesión y fagocitosis y una importante actividad colagenolítica^15-17. Estos hallazgos podrían implicar para algunos autores un papel en las primeras fases del proceso de destrucción de los tejidos periodontales¹. 

Ambos protozoos no poseen formas de resistencia y los mecanismos de transmisión de persona a persona se realizan por el trofozoíto a través del contacto directo: beso, gotas de saliva o uso de utensilios de personas infectadas¹⁰. Estos parásitos suelen asociarse a diferentes patologías odontológicas y pueden estar presentes también en bocas aparentemente sanas^18,19. 

Entre las patologías cuya incidencia ha aumentado progresivamente se encuentran las enfermedades metabólicas y la diabetes en particular. La diabetes es una pandemia en aumento. Se prevé que para el año 2010 el número de casos en América llegará a 45.000.000. Es un grave problema de salud pública y de alto costo que aqueja a todos sin distinguir edades y niveles socioeconómicos. Además los diabéticos tienen un riesgo mayor de desarrollar otras enfermedades lo que repercute en su calidad de vida^20*. Si bien la diabetes no origina ninguna enfermedad bucal específica, está demostrado que muchas de ellas se observan con mayor frecuencia y agresividad en diabéticos descompensados. 

La insuficiente secreción de insulina determina estados patológicos observados habitualmente como gingivitis marginal moderada con frecuente producción de lesiones periodontales y tendencia a atrofia alveolar difusa^21**,22. La evolución de la enfermedad periodontal en diabéticos insulino-dependientes, aumenta proporcionalmente con la edad registrándose una prevalencia del 40% entre los 19 y 33 años^21**,22 . 

Por sí sola la diabetes no es cau- sa de enfermedad periodontal, en ausencia de placa microbiana. Los malos hábitos de higiene oral, la falta de control odontológico periódico, la placa bacteriana específica con mayor patogenicidad, la diabetes descompensada, actúan y aceleran el proceso destructivo periodontal. La enfer-medad periodontal engloba un con- junto de alteraciones inflamatorias del periodonto, producidas por la acumulación y proliferación de ciertos microorganismos^21**. 

El objetivo de este trabajo preliminar fue estudiar la frecuencia de estos protozoos bucales en una población de pacientes diabéticos y la relación de E. gingivalis y T. tenax con IgA, pH y con las periodontopatías. 

Material y método 

Se trabajó con 50 pacientes diabéticos adultos de ambos sexos cuyas edades oscilaron entre 25 y 69 años que concurrieron al servicio de Diagnóstico de la Facultad de Odontología de Rosario, Argentina. 

La periodontopatía valorada en este trabajo fue la enfermedad gingival (gingivitis) como alteración patológica de las encías. El examen gingival se basó en las observaciones de las alteraciones de la forma, el tamaño, el color, la consistencia, la superficie y la presencia de secreción que indicaban una posible desviación de la normalidad. La condición esencial para el estudio de los microorganismos, E. gingivalis y T. tenax en este trabajo, fue la presencia de placa bacteriana y/ o cálculo que provocarían la inflamación gingival. 

De cada paciente se obtuvo una muestra de saliva y una de placa y/o cálculo dental. Ambas fueron recogidas por la mañana sin cepillado previo o tras un tiempo no menor a 3 o 4 horas desde la última higiene bucal. 

La muestra de cálculo y/o placa dental se obtuvo mediante curetas estériles de la zona supra gingival en toda la boca y en la región anteroinferior se extrajo, además, de forma subgingival. 

El cálculo obtenido por raspado con cureta estéril del material acumulado en las raíces de los dientes^10,23 se colocó sobre un portaobjetos, se diluyó con solución fisiológica estéril mantenida a temperatura ambiente (25º a 28º C) y se observó en microscopio óptico a 100 y 400 aumentos. 

En saliva se realizó una primera observación microscópica directa y una post centrifugación (2000 rpm) a 100 y 400 aumentos para detectar E. gingivalis y T. tenax. 

La microscopía de todas las muestras frescas se realizó inmediatamente después de haber sido extraídas. 

Ambos materiales fueron cultivados en medios espécificos: para E. gingivalis, Bactoentamoeba y medio de Diamond modificado para T. tenax²⁴, durante 3 días y controlados diaramente. 

Las muestras de saliva y cálculo y/o placa dental fueron coloreadas por la tinción tricrómica de Gomori²⁵ a los fines de identificar E. gingivalis. 

En las muestras de saliva se determinó el pH mediante tiras de papel indicador (valor normal 6,0-7,5) y la concentración de IgA secretoria por el método de inmunodifusión radial²⁶ (valor normal 20 - 40 mg/dl). T. tenax se identificó por su morfología y su movilidad característica. E. gingivalis se diagnosticó por su motilidad activa debido a la emisión explosiva de seudópodos, así como también por las características estructurales típicas y la presencia en el endoplasma de vacuolas con inclusiones de restos de núcleos degenerados de linfocitos, bacterias y a veces hematíes. 

La identificación de E. gingivalis en los frotis coloreados se realizó por las características de distribución de cromatina nuclear y en algunas ocasiones la inclusión citoplasmática de glóbulos rojos. 

Se realizó el test de Chi Cuadrado de Likelihood Ratio para estudiar la asociación de la presencia de parásitos con IgA, pH y periodontopatías con un nivel de significación de 0,05²⁷, siendo la potencia para el tamaño de muestra (n = 50) de 0,10²⁸. 

Resultados 

De los 50 pacientes estudiados 37 (74%), (IC 95% 0,74 ± 0,12) presentaron protozoos orales; 25 monoparasitados con E. gingivalis (IC 95% 0,50± 0,14), 3 con T. tenax (IC 95% 0,06±0,07) y los 9 restantes con ambos simultáneamente (IC 95% 0,18±0,11). 

La prevalencia en los 37 pacientes parasitados con E. gingivalis fue de 91,9% (IC 0,92±0,09) y 32,4% (IC 0,32±0,15) para T. tenax, predominando ambos protozoos en la muestra de placa y/o cálculo dental. 

La distribución de E. gingivalis en los pacientes fue: 13 en ambos materiales, 19 en cálculo y 2 en saliva. La observación microscópica directa mostró mayor sensibilidad diagnóstica con respecto a la utilización de técnicas de coloración tricrómica de Gomori y cultivo. 

La T. tenax se diagnosticó en 12 pacientes: 6 por observación microscópica directa (3 en saliva y 3 en cálculo) y los 6 restantes fueron diagnosticados solamente por cultivo. Esta última metodología mostró un aumento en la sensibilidad diagnóstica de T. tenax. 

Los valores de IgA y pH en los pacientes estudiados se muestran en las tablas 1 y 2. 

 

La evaluación clínica permitió determinar que 30 pacientes (60%) presentaron periodontopatías según se observa en la tabla 3. La patología bucal observada en todos los pacientes fue gingivitis por cálculo o marginal simple. 

 

No se registró asociación en ninguno de los tres casos estudiados, siendo los respectivos valores de p correspondientes al test de Chi Cuadrado de Likelihood Ratio los siguientes: 

IgA y parásitos: p = 0,498 > 0,05 

pH y parásitos: p = 0,321 > 0,05 

Patología bucal y parásitos: p = 0,515 > 0,05 

Discusión 

El 74% de la población estudiada presentaron parásitos bucales, con una alta frecuencia de E. gingivalis (91,9%) y T. tenax (32,4%). Estos hallazgos fueron semejantes a lo comunicado por otros autores^29**. 

La detección de ambos protozoos predominó en las muestras de placa y cálculo dental en discordancia con lo comunicado por Franjola³⁰ que encontró T. tenax con mayor frecuencia en saliva. 

La IgA salival secretora es particularmente importante para proteger las mucosas contra las infecciones orales. 

Los estudios estadísticos no evidenciaron asociación entre la variable IgA y parásitos orales (p = 0,498>0,05). Con la utilización de la misma metodología de análisis estadístico se concluye que las variables pH y presencia de protozoos no presentan asociación (p = 0,321 > 0,05). El estudio estadístico reveló que no habría relación entre la patología bucal y la presencia de parásitos (p = 0,515 > 0,05). 

La valoración de la potencia del estudio basado en el tamaño de la muestra (50) fue de 0,10, no permitiendo detectar asociación entre las tres variables estudiadas y la presencia de parásitos. 

Por tanto, en un estudio posterior se debería analizar una muestra mayor de pacientes diabéticos aumentando la potencia de la prueba estadística, lo que permitiría detectar posibles asociaciones. 

Conclusión

Se concluye que siendo la periodontopatía del diabético una patología que se inicia en edad muy temprana, la importancia de realizar controles desde el punto de vista odontológico, debido a su predisposición, a fin de instaurar un tratamiento adecuado, tanto de la gingivitis como de los parásitos. 

Agradecimientos

Especialmente a la doctora Ada Lucca Fiappo, Profesora adjunta en Odontopediatría, directora del Servicio de Diagnóstico por la selección de pacientes y la obtención de muestra y a la Profesora adjunta Beatriz Pérez del Area de Estadística por su valioso aporte en el análisis estadístico.

Bibliografía recomendada

Para profundizar en la lectura de este tema, el/los autor/es considera/an interesantes los artículos que aparecen señalados del siguiente modo: *de interés **de especial interés. 

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Describe las alternativas de la diabetes sobre la salud pública en la población. Considera el envejecimiento demográfico de las poblaciones y las tendencias en los principales factores de riesgo. Asimismo ciertos grupos étnicos en América presentan una mayor incidencia y prevalencia de la diabetes. 

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Relata la presencia de Entamoeba gingivalis y Trichomonas tenax en pacientes diabéticos. Los resultados del análisis estadístico no muestran correlación entre diabetes y presencia de protozoos.

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