Revista de Diagnóstico Biológico

El Laboratorio Clínico es una especialidad médica

La Citometría de Flujo en el Análisis de las Plaquetas: (I) Aspectos Estructurales y Funcionales de las Plaquetas

Detección mediante RT-PCR de células tumorales circulantes en pacientes con melanoma maligno en estadio III: Correlación con el grosor y la histología del tumor

El objetivo de nuestro estudio ha sido evaluar la utilidad de la Transcriptasa reversa y Reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) en la detección de la enzima tirosinasa como marcador de la presencia de células derivadas de melanocitos en pacientes con melanoma maligno en estadio III y su correlación con factores pronósticos como el grosor y la forma clínico-histológica del tumor. La detección de células de melanoma circulantes mediante RT-PCR se ha realizado en un grupo de 28 pacientes con melanoma maligno en estadio III (clasificación de la AJCC). Nuestros resultados demuestran una alta positividad de la PCR en este grupo de pacientes siendo más frecuente en tumores con un grosor 4mm (75%). No obstante, no encontramos correlación entre la positividad de la PCR y la forma clínico-histológica del tumor. Nuestros resultados sugieren la posibilidad de aplicar la detección del ARNm de la tirosinasa mediante RT-PCR como un nuevo marcador en el pronóstico del melanoma maligno.

The objetive of our study was to evaluate the utility of the reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) in the detection of the tyrosinase enzyme as a marker of circulating melanocites in melanoma patients (stage III) and the correlation with prognostic factors such as thickness and histologic type tumors. Melanoma cells were identified through the tyrosinase mRNA by RT-PCR from 28 patients with stage III of malignant melanoma (classified to the AJCC guidelines). Our findings showed a high PCR positivity from patients in stage III, which were more frequent in primary tumors measuring 4mm (75%). However, no correlation was observed between the positive PCR results and the histological appearance of the primary tumor. Our results suggest the possible application of the PCR assay for tyrosinase mRNA as a new marker in judging the prognosis of malignant melanoma.

Dislipemias en pacientes infectados por VIH

Objetivo. Investigar los niveles de lípidos séricos en pacientes infectados por VIH. Pacientes. 206 sujetos, 96 infectados por VIH y 110 seronegativos. Los pacientes fueron divididos en grupos según su recuento de linfocitos CD4 y carga viral, así como por conductas de riesgo. Resultados. El colesterol total y el HDL fueron significativamente más bajos en VIH (+). Mientras que los triglicéridos y los cocientes de riesgo cardiovascular fueron significativamente más altos en este grupo. A medida que disminuyen los CD4 y aumenta la carga viral, disminuyen la albúmina y el colesterol de forma lineal progresiva, mostrando cambios muy graduales sólo significativos entre cada grupo y el grupo sano. HDL colesterol muestra los cambios más significativos a medida que se produce el deterioro inmunológico, mientras LDL y triglicéridos no muestran cambios significativos a lo largo de la enfermedad (previa a sida). Conclusión. HDL colesterol puede ser un marcador útil de progresión de la enfermedad. Puesto que la alteración del metabolismo lipídico puede contribuir a la disfunción inmune, la corrección del primero podría tener valor terapeútico.

Objetive. To investigate serum lipid levels in patients infected by HIV. Patients. 206 subjects, 96 HIV infected and 110 uninfected. Patients were divided into groups according to their CD4 number, viral load and risk behaviour. Results. Total cholesterol and HDL were significatively lower in HIV (+). Triglyceride and cardiovascular risk rates were significatively higher in this group. As CD4 decrease and viral load increase, albumina and cholesterol decrease in a linear and progresive way, showing very gradual changes that were only significative between each group and the healthy group. As immunological damage advances HDL shows the most significative changes. However LDL and triglyceride don´t show significative changes during the illness (previous to aids). Conclusion. HDL cholesterol can be a useful parameter of illness progression. As it seems likely that the altered lipid values contribute to immune dysfunction, its correction could be of therapeutic value.

**Bacteriemia por Stomatococcus mucilaginosus en un paciente de riesgo**

Paludismo importado

Esterilidad masculina y microdeleciones en el cromosoma Y

Mesa redonda: AEBM y AEFA ante los análisis clínicos

Caracterización biomolecular del cáncer de laringe: relación entre ploidia, actividad proliferativa y LOH en la región 9p21

El carcinoma escamoso de laringe o LSCC (Laryngeal Squamous Cell Carcinoma) representa más del 95% de las neoplasias de laringe. Representa cerca del 2% de todos los cánceres humanos en el mundo Occidental y es una importante causa de muerte entre los tumores de cabeza y cuello. A pesar de los avances en el estudio de LSCC los indicadores pronóstico "clasicos" no permiten identificar los pacientes con elevado riesgo de recaída o muerte. En los últimos años se intentan identificar nuevos factores biológicos para predecir la evolución del tumor. El objetivo de este trabajo es el estudio de los factores biológicos implicados en el carcinoma escamoso de laringe: actividad proliferativa (SPF), contenido celular de DNA y la determinación de posibles alteraciones genéticas en el gen supresor p16, pérdida de heterocigosidad (LOH) y mutaciones puntuales. Este estudio se realizó en 56 pacientes intervenidos quirúrgicamente de cáncer de laringe. Se realizó la evaluación de la ploidía y de la SPF mediante citometría de flujo. Para la valoración de la LOH en el gen p16 se realizó extracción de DNA, electroferesis en un gel de poliacrilamida al 8% y coloración con nitrato de plata. Las mutaciones en el gen p16 fueron detectadas mediante análisis SSCP después de la amplificación mediante PCR del exón 1. Se detectó aneuploidía en el 63% de los pacientes y de ellos el 9% presentaban multiclonalidad. En nuestra serie de pacientes, el 21% presentaba LOH en la región 9p21 (locus D9S1747). El análisis mutacional del exón 1 se realizó con DNA genómico. La LOH en la región 9p21 estaba asociada a SPF (p<0.05) y a la aneuploidía del DNA (p<0.05) Además observamos una asociación significativa entre aneuploidia y SPF (p<0.01). No se encontró ninguna asociación entre LOH, ploidía, de DNA, SPF y las otras características clinicopatológicas estudiadas. Este estudio demuestra la existencia de aneuploidía y de SPF en LSCC y también evidencia la estrecha relación entre las variables citométricas estudiadas y la LOH de p16. Por lo tanto, en las células aneuploides de LSCC, en las cuales está aumentada la actividad proliferativa, la pérdida de este gen supresor p16 estimularía dicha proliferación celular favoreciendo la aparición de otras alteraciones geneticas.