Revista Española de Enfermedades Digestivas

Interleukins and colon cancer

Evaluation of the antitumor activity of interleukin-12 in an experimental murine model of colorectal cancer induced by 1,2 dimethylhydrazine (DMH)

Objective: interlukin 12 (IL-12) is a cytokine that may enhance the proliferation and cytotoxic activity of T lymphocytes and natural killer (NK) cells. A relationship between extensive intratumoral infiltration of NK cells and longer survival rates in colorectal cancer (CRC) patients was previously noted. Preliminary evidence suggests that the combined administration of IL-12 and IL-2 may produce additive immunomodulatory activity. The purpose of this study was to determine whether the systemic administration of IL-12 (+/- IL-2) may induce an immune response against CRC as induced by 1,2-dimethylhydrazine (DMH). Methods: sixty-five 6-week-old Wistar rats were treated with weekly subcutaneous injections of DMH for 26 weeks at a dose of 20 mg/kg of body weight. Once tumoral induction was over, the animals were randomly allocated to one of three groups: I, control; II, intraperitoneal injections of IL-12; III, intraperitoneal injections of IL-12 combined with IL-2. At 30 weeks, all surviving animals were sacrificed. We studied the following parameters in each rat - number of tumors, size of tumors, and total tumoral volume.Tumor samples were studied using the monoclonal antibody CD 57 for the detection of NK cells. The extent of NK infiltration was classified as small, less than 50 NK cells/50 high-power field (HPF); moderate, 50 to 150 NK cells/50 HPF, and extensive, more than 150 NK cells/50 HPF. Results: thirty-five rats died before completion of the carcinogen exposure, and 30 rats were randomized (10 each group). In group II, 2 animals died during treatment. All rats in groups I and III developed tumors, while in group II two rats (25%) were tumor-free. Moreover, only one rat in group II developed multiple neoplasms, in contrast with group I and group III, where six rats (60%) and seven rats (70%), respectively, had more than one tumor. We found statistically significant differences in the mean number of tumors found in group II when compared to group I (p=0.028) and group III (p = 0.019). Other parameters measured, such as biggest tumor size and total tumoral volume were found to be lower in group II, although no statistical differences were found between groups. Only 10% of rats in group I showed moderated/extensive NK cell infiltration, vs. 60% of rats in group II (p = 0.077) and 70% in group III (p = 0.02). Conclusion: The administration of DMH to rodents provides a reliable and consistent means of inducing CRC that may be suitable for the evaluation of anti-cancer therapies. Our findings suggest that IL-12 is effective against the development of experimental CRC. Its antineoplastic effect could be attributed to the stimulus of this cytokine on the intratumoral infiltration of NK cells.

Objetivo: la interleucina (IL-12) es una citocina que estimula la proliferación y la actividad citotóxica de los linfocito T y las células natural killer (NK). En trabajos previos se ha observado una relación entre la infiltración intratumoral de células NK y una mayor supervivencia en carcinomas colorrectales (CCR). Existen evidencias de un efecto aditivo en la actividad inmunomoduladora de la asociación de IL-12 con IL-2. Así, nos hemos propuesto el estudio de la capacidad de respuesta inmune antitumoral, tras la administración sistémica de IL-12 sola o combinada con IL-2, en un modelo experimental de CCR inducidos mediante la administración de 1,2-dimetilhidracina (DMH). Método: sesenta y cinco ratas Wistar de 6 semanas a las que se administró en inyección subcutánea una dosis semanal de DMH a razón de 20 mg/kg de peso durante 26 semanas. Finalizado el periodo de inducción, los animales se distribuyeron aleatoriamente en tres grupos. I: grupo control. Grupo II, se administró IL-12 recombinante murina. Grupo III: se administró IL-12, combinada con IL-2. Las ratas se sacrificaron en la semana 30, estudiándose los siguientes parámetros: número y localización de tumores, tamaño y carga tumoral. Se realizó inmunotinción para células NK con anticuerpo monoclonal CD 57. Se establecieron tres grupos según la cuantía del infiltrado: leve, menos 50 células/50 campos de gran aumento (CGA), moderado, entre 50 y 150/células/50 CGA y elevado, más de 150 células/50 CGA. Resultados: durante la inducción tumoral fallecieron 35 ratas. Las 30 restantes fueron distribuidas aleatoriamente en 3 grupos de 10. Durante las 2 semanas de tratamiento fallecieron 2 ratas, del grupo II. Todas las ratas de los grupos I y III desarrollaron CCR. En el grupo II, dos animales (25%) no desarrollaron tumor. Sólo una rata del grupo II desarrolló neoplasias múltiples en contraste con el grupo I en el que esto ocurrió en 6 ratas (60%) y siete (70%) en el grupo III. Se hallaron diferencias estadísticamente significativas en el número de tumores desarrollados entre el grupo II respecto al I (p = 0,028) y al grupo III (p = 0,019). El mayor tamaño tumoral o el volumen tumoral total fueron menores en el grupo II pero no se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas con los restantes grupos. Un 10% de las ratas del grupo I presentó moderada o extensa infiltración, frente al 60% del grupo II (p = 0,077) y al 70% del grupo III (p = 0,02). Entre los grupos II y III no se encontró ninguna diferencia estadística (p = 1). Conclusión: El modelo usado de inducción tumoral es un modelo útil para el estudio de la eficacia de distintos tratamientos antitumorales. Pensamos que la IL-12 tiene un efecto antineoplásico frente al desarrollo de tumores experimentales, lo que puede ser atribuido, al menos en parte, al estímulo ejercido por esta citocina sobre los infiltrados intratumorales de células NK.

Immunopathological modifications in the rectal mucosa from an animal model of food allergy

Aim: the aim is to determine immunopathological modifications in rectal mucosa from rabbit after local challenge in sensitized animals with ovalbumin (OVA). Experimental design: thirty rabbits divided into three groups: G1: normal, G2: subcutaneously OVA sensitized, G3: sensitized, locally OVA challenged and sampled 4 hours after challenge. Specific anti-OVA IgE levels were evaluated by passive cutaneous anaphylaxis test (PCA). In each group 200 high microscopical power fields (HPF) were counted. Results were expressed as arithmetic mean and SE. Statistical analysis was made using Student t test. Anti-CD4, CD5, µ chain, CD25 and RLA II monoclonal antibodies were used. Avidin biotin horseradish peroxidase system was used. Results: CD 4: G1: 8,3 ± 0,06; G2: 13,4 ± 0,08 and G3: 8,25 ± 0,06. CD 5: G1: 7,3 ± 0,05; G2: 9,4 ± 0,05 and G3: 11,3 ± 0,06. CD 25: G1: 13 ± 0,08; G2: 15,1 ± 0,13 and G3: 25,5 ± 0,15. m chain: G1: 10,4 ± 0,06; G2: 3,8 ± 0,02 and G3: 6,0 ± 0,10. RLA II (DR): G1: 11,6 ± 0,O5; G2: 19,2 ± 0,09 and G3: 19,1 ± 0,11. In all cases, experimental groups (G2 and G3) presented statistical significant differences vs. control group (G1) (p < 0.001). Conclusions: interleukin-2 receptor (CD25+ cells) increase in experimental groups. Cells expressing µ chain decreased in G2 and G3 likely due to activation of B cells and subsequent expression of other immunoglobulin chains in cell surface. RLA II expression is higher in G2 and G3. This receptor is considered an activation marker expressed by macrophages, T and B cells. We conclude that obtained data are important to elucidate immunopathology of local anaphylactic reaction in rectal mucosa from systemic sensitized animals.

Objetivo: determinar las modificaciones inmunopatológicas en la mucosa rectal de conejo sensibilizado con ovoalbúmina (OVA) y desafiado localmente. Diseño experimental: treinta conejos divididos en tres grupos G1: normal; G2 sensibilizado por vía subcutánea con OVA y G3: sensibilizado y desafiado localmente con OVA y muestreados 4 horas después del desafío. Los niveles de IgE anti-OVA específica fueron evaluados por el test de anafilaxia cutánea pasiva (PCA). Se contaron 200 campos de mayor aumento en cada grupo. Los resultados fueron expresados como media aritmética y error standard aplicándose el test de la t de Student. Resultados: CD 4: G1: 8,3 ± 0,06; G2: 13,4 ± 0,08 y G3: 8,25 ± 0,06. CD 5: G1: 7,3 ± 0,05; G2: 9,4 ± 0,05 y G3: 11,3 ± 0,06. CD 25: G1: 13., ± 0,08; G2: 15,1 ± 0,13 y G3: 25,5 ± 0,15. Cadena µ: G1: 10,4 ± 0,06; G2: 3,8 ± 0,02 y G3: 6,0 ± 0,10. RLA II (DR): G1: 11,6 ± 0,O5; G2: 19,2 ± 0,09 y G3: 19,1 ± 0,11. En todos los casos los grupos G2 y G3 presentaron diferencias estadísticamente significativas versus G1 (p < 0,001). Conclusión: observamos un incremento en el número de células CD25+ (receptor interleuquina-2) en G3 y una disminución en células cadena µ positivas en G2 y G3, probablemente debido a la activación de células B y expresión de otras inmunoglobulinas en superficie celular. La expresión de RLA II fue mayor en G2 y G3. Este receptor es considerado un marcador de activación expresado por macrófagos, células T y B. Concluimos que los datos obtenidos constituyen un aporte al conocimiento de la inmunopatología de la reacción anafiláctica local en mucosa rectal en animales sensibilizados por vía sistémica.

Cyclooxygenase-2 inhibition in colon experimental carcinogenesis

Background: an overexpression of cyclooxygenase-2 (COX-2) has been seen in colon tumors; therefore, COX-2 specific inhibitors may be used as preventive agents. The aim of this study was to investigate the effect of both selective and non-selective COX-2 inhibitors on the incidence of colonic tumors in a model of chemical carcinogenesis in the rat. Design: experimental study with 65 male Sprague-Dawley rats randomly assigned to one of four groups: (a) control (n = 20), with chemical carcinogenesis using 1-2 dimethylhydrazine (1-2 DMH); (b) acetylsalicylic acid (ASA) (n = 15), with chemical carcinogenesis and the addition of ASA at 30 mg/kg; (c) low-dose rofecoxib (n = 15), with chemical carcinogenesis and the addition of rofecoxib at a dose of 1.2 mg/kg; (d) high-dose rofecoxib (n = 15), with carcinogenesis and the addition of rofecoxib at 3 mg/kg. Carcinogenic induction was performed with 1-2 DMH at a weekly dose of 25 mg/kg for 18 weeks. The main parameter evaluated was percentage of neoplastic colonic tissue, which relates tumor surface area to colon surface area. Results: rofecoxib at a dose of 3 mg/kg significantly reduced chemical colon carcinogenesis in rats (p < 0.01). Rofecoxib in lower doses had the same effect on adenomas (p < 0.05) with no effect on adenocarcinomas. Rofecoxib reduced COX-2 expression in tumoral tissue from adenomas and adenocarcinomas (p < 0.01). Conclusions: rofecoxib prevents chemical colon carcinogenesis in the rat, with a reduction of tumoral colonic percentage in adenocarcinomas and tumoral COX-2 expression.

Introducción: se ha comprobado a nivel clínico y experimental la existencia de sobreexpresión de la ciclooxigenasa-2 (COX-2) en los tumores de colon, por lo que los inhibidores de dicha enzima podrían tener un efecto preventivo. El objetivo del estudio es investigar el efecto de la inhibición de la ciclooxigenasa en un modelo de carcinogénesis cólica farmacológica en la rata. Material y métodos: estudio experimental en 65 ratas Sprague-Dawley macho, asignadas a uno de los grupos: control (n = 20), con carcinogénesis farmacológica con 1-2 dimetilhidrazina; grupo ácido acetilsalicílico (n = 15), con carcinogénesis y adición de AAS, grupo Inhibidores COX-2 a bajas dosis (n = 15), con carcinogénesis y adición de rofecoxib a dosis de 1,2 mg/kg, y grupo Inhibidores COX-2 a altas dosis (n = 15), con carcinogénesis y rofecoxib a dosis de 3 mg/kg. El principal parámetro evaluado es el porcentaje de tejido cólico neoplásico y la expresión de COX-2 en el colon normal y neoplásico. Resultados: el rofecoxib a dosis altas reduce el porcentaje de colon ocupado por adenocarcinomas inducidos (p < 0,01). El rofecoxib a dosis bajas presentó el mismo efecto sobre los adenomas (p < 0,05), sin efecto sobre los adenocarcinomas. La expresión COX-2 es superior en los adenocarcinomas frente a los adenomas. El rofecoxib redujo la expresión COX-2 respecto al control y AAS (p < 0,01), tanto en los adenomas como en los adenocarcinomas, no mostrando este efecto sobre el colon normal. Conclusiones: el rofecoxib redujo la carcinogénesis cólica inducida en ratas, reduciendo la expresión COX-2 en los tumores y disminuyendo el porcentaje de colon neoplásico.

Laparoscopic treatment of cholelithiasis in cirrhotic patients

Objective: to assess the safety and efficacy of laparoscopy in the treatment of symptomatic cholelithiasis in patients with Child´s Class A and Class B cirrhosis. Study design: descriptive and retrospective study. Patients: we studied 14 patients (mean age 60 yrs) with Child´s Class A and Class B hepatic cirrhosis who underwent laparoscopic cholecystectomy. We analyzed the occurrence of intraoperative and postoperative complications. Results: eight patients were women (57.14%) and 6 were men (42.85%). Eight of the 14 patients presented with Child's Class B cirrhosis and 6 patients with Class A. Cholecystectomy was programmed for all patients. The average duration of surgery was 77 min. Intraoperative complications occurred in 2 patients (14.28%) in the form of liver bed bleeding. Postoperative complications were observed in 3 patients (21.42%), 2 presented with ascites which led to a worsening of Child's Class in one of them, and the third patient presented with angina-like symptoms (acute, sharp pain in the chest irradiating to the back). Mean length of hospital stay was 3 days. No postoperative morbidity or mortality occurred, and there were no conversions. Conclusions: LC (laparoscopic cholecystectomy) is a safe and effective alternative for the treatment of symptomatic cholelithiasis in patients with well-compensated Child's Class A and Class B cirrhosis. Postoperative morbi-mortality is low, bleeding is unimportant, and both duration of surgical procedure and hospital stay are short.

Objetivo: evaluar la seguridad y eficacia del uso de la laparoscopia en pacientes cirróticos en estadio A y B de Child-Pugh con colelitiasis sintomática. Diseño del estudio: estudio descriptivo, retrospectivo. Pacientes: catorce pacientes con una edad media de 60 años diagnosticados de cirrosis hepática en estadios A y B que se les practicó colecistectomía laparoscópica. Se estudia la aparición de complicaciones intraoperatorias y postoperatorias tras la intervención Resultados: ocho (57,14%) casos eran mujeres y 6 ( 42,85%) varones. De los 14 pacientes, 8 presentaban un estadio Child-Pugh B y 6 un Child-Pugh A. Todos los pacientes se intervienen de colelitiasis de forma programada. El tiempo operatorio medio fue de 77 min. Dos (14,28%) de los pacientes presentaron complicaciones intraoperatorias, sangrado del lecho quirúrgico. Tres (21,42%) pacientes presentaron complicaciones postoperatorias: dos (14,28%) presentaron ascitis con empeoramiento del Child-Pugh en uno de ellos y el otro presentó un cuadro anginoso. La estancia media de estos pacientes es de 3 días. No hubo ninguna muerte tras la intervención y no hubo ninguna reconversión. Conclusiones: la CL es una alternativa segura y efectiva en el tratamiento de colelitiasis sintomáticas en pacientes con cirrosis en estadio A y B compensada. Ofrece una baja morbimortalidad postoperatoria con una escasa pérdida de sangre, un tiempo operatorio corto y una reducida estancia hospitalaria.

Clinical and ethical implications of genetic counselling in familial adenomatous polyposis

The association of specific genetic disturbances with the development of hereditary cancer helps us to understand the risk of suffering from it, the possibility of an earlier diagnosis, and the treatment and prevention of this disease. Familial adenomatous polyposis (FAP) is a pre-neoplastic syndrome characterized by the presence of hundreds of adenomatous polyps in the colon, which develop into a carcinoma. FAP can be diagnosed using sequencing techniques to detect mutations in the germinal line of the APC (adenomatous polyposis coli) gene. The genetic diagnostic approach in families with FAP, previously followed up in the Gastrointestinal Clinic, has both advantages and disadvantages, and places us nearer the disease and patient. Disclosing the results of this genetic test entails relevant problems in clinical practice, which affect the health field and raise legal and ethical issues, along with the familial, occupational, and social implications that knowing the genetic status can have on the patient. Genetic analysis is rare in normal clinical practice, which involves errors in the interpretation of the results obtained, and during the process of genetic counselling. Specialized multidisciplinary units are necessary for the management of patients with FAP undergoing analysis and appropriate genetic counselling, thus providing an individualized service. The creation of FAP registers and protocols for this healthcare process should optimize the management of these patients and their families.

La asociación de determinadas alteraciones genéticas con la aparición de cáncer hereditario, nos permite conocer el riesgo de padecerlo, posibilitando el diagnóstico precoz, el tratamiento y la prevención de la enfermedad. La poliposis adenomatosa familiar (PAF) es un síndrome preneoplásico que se caracteriza por la presencia de cientos de pólipos adenomatosos en colon, que evolucionarán hacia carcinoma. La PAF puede ser diagnosticada mediante técnicas de secuenciación que detectan mutaciones en la línea germinal del gen APC (adenomatous poliposis coli). El abordaje del diagnóstico genético en familias con PAF seguidas previamente en la consulta de digestivo, ha permitido poner de manifiesto tanto las ventajas como los inconvenientes de esta forma de acercarnos a la enfermedad y a los pacientes. La revelación de los resultados de la prueba genética comporta importantes problemas en la práctica clínica, que afectan tanto al ámbito sanitario, como al ético y legal, además de las implicaciones familiares, laborales y sociales que el conocimiento del status genético puede tener para el paciente. El análisis genético es poco frecuente en la práctica clínica habitual, lo que conlleva errores tanto en la interpretación de los resultados obtenidos como durante el proceso del consejo genético. Son necesarias unidades multidisciplinares especializadas en el manejo de pacientes con PAF, en las cuales se realice un análisis y un consejo genético adecuado, permitiendo así una atención personalizada. La creación de registros de PAF y la protocolización de este proceso sanitario debería optimizar el manejo de estos pacientes y sus familias.

Fatal portal thrombosis after laparoscopic Nissen fundoplication

Portal and mesenteric vein thrombosis is a very uncommon complication of laparoscopic surgery, especially after anti-reflux procedures. We report the case of a twenty-year-old man with a history of alcohol and cocaine consumption. A Nissen fundoplication was performed. The patient received a single 20-mg dose of enoxaparin (Clexane®, Aventis Pharma, Spain) two hours before surgery for antithrombotic prophylaxis. On the seventh postoperative day the patient had a portal and mesenteric venous thrombosis, which was confirmed at laparotomy, with both extensive small-intestine necrosis and partial colon necrosis. Despite anticoagulant therapy, the patient died 24 hours later. Surgical findings were confirmed at necropsy. Portal and mesenteric venous thrombosis is an uncommon but severe and even fatal complication after laparoscopic anti-reflux surgery. When other pro-thrombotic, predisposing conditions such as laparoscopic surgery and cocaine consumption are present, the usual prophylactic doses of low molecular weight heparin might not be sufficient to protect against this life-threatening complication.

La trombosis venosa mesentérica y portal es una complicación infrecuente de la cirugía laparoscópica. Presentamos el caso de un varón de 20 años, consumidor de cocaína inhalada, al que se realiza una funduplicatura de Nissen laparoscópica, administrándose 20 mg de enoxaparina (Clexane® , Aventis Pharma, Spain) preoperatoriamente. El séptimo día postoperatorio, el paciente presenta una trombosis venosa mesentérica y portal, que se confirma en la laparotomía, con necrosis de todo el intestino delgado y segmentaria del colon, falleciendo el paciente a las 24 horas, a pesar de la terapia anticoagulante y confirmándose el diagnóstico en la necropsia. La trombosis mesentérica y portal es una complicación infrecuentre, pero grave y potencialmente mortal, de la cirugía laparoscópica del reflujo gastroesofágico. Cuando se asocian varios factores predisponentes con un potencial trombótico demostrado aislado, como la cirugía laparoscópica y el consumo de cocaína, no parece que las dosis habituales de profilaxis tromboembólica sean suficientes para evitar esta grave complicación.

Severe intestinal involvement in Wegener's granulomatosis with negative c-ANCAs

Enfermedad celiaca

Quiste hidatídico fistulizado al colon

Fístula biliar tras hepatorrafia por traumatismo hepático: Posibilidad de tratamiento postural

Tumor mesenquimal de vesícula biliar

Pancreatitis crónica autoinmune: una entidad de difícil diagnóstico diferencial

Cirrosis biliar primaria, síndrome "sicca" y anemia hemolítica autoinmune

Colangitis esclerosante primaria como causa de un pseudotumor de la confluencia de la vía biliar