COSTA ORSINE, Joice Vinhal et al. Cytotoxicity of Agaricus sylvaticus in non-tumor cells (NTH/3T3) and tumor (OSCC-3) using tetrazolium (MTT) assay. []. , 28, 4, pp.1244-1254. ISSN 1699-5198.  https://dx.doi.org/10.3305/nh.2013.28.4.6461.

^len^aThe purpose of this study was to assess the cytotoxic effect of the non-fractionated aqueous extract of A. sylvaticus mushroom in cultures of non-tumor cells (NIH3T3) and tumor cells (OSCC-3). The cells were maintained in DMEN cell culture medium added of 10% of fetal bovine serum and 1% antibiotic. For the cytotoxicity test we prepared the aqueous mushroom extract at concentrations of 0.01 mg.ml^-1, 0.02 mg.ml^-1, 0.04 mg.ml^-1, 0.08 mg.ml^-1, 0.16 mg.ml^-1, and 0.32 mg.ml^-1. For the culture, 2 x 10⁵ cells/ml was deposited in 96-well microplates during 24 hour incubation with subsequent exchange of medium by another containing the mushroom concentrations. After 24 hour incubation the medium was discarded and 100 ml of tetrazolium blue (MTT) was added at a concentration of 5 mg.ml^-1. The microplates were incubated for 2 h at 37^o C. Spectrophotometric analysis was performed using 570 nm wavelength. From the values of the optical densities we determined the drug concentration capable of reducing cell viability by 50%. Therefore, the mushroom A. sylvaticus, at all concentrations tested, did not show cytotoxic effects, once the inhibitory concentration (IC₅₀) obtained for tumor cells OSCC-3 was 0.06194 mg.ml^-1, and the IC₅₀ checked for non-tumor cells NIH3T3 was 0,06468 mg.ml^-1. This test made it possible to determine that A. sylvaticus mushroom has no cytotoxic effects, suggesting its use safe for human consumption.^les^aEl objetivo de este estudio fue evaluar el efecto citotóxico de un extracto acuoso no fraccionado de la seta A. sylvaticus en cultivos de células no tumorales (NIH3T3) y tumorales (OSCC-3). Se mantuvo a las células en un medio de cultivo celular DMEN al que se añadió suero de ternera fetal al 10% y antibiótico al 1%. Para la prueba de toxicidad, se preparó el extracto acuoso del hongo a concentraciones 0,01 mg.ml^-1, 0,02 mg.ml^-1, 0,04 mg.ml^-1, 0,08 mg.ml^-1, 0,16 mg.ml^-1 y 0,32 mg.ml^-1. Para el cultivo, 2 x 105 células/ml se depositaron en microplacas de 96 pocillos durante 24 horas de incubación con el subsiguiente recambio del medio por otro que contenía las concentraciones del hongo. Tras 24 horas de incubación, se desechó el medio y se añadieron 100 ml de azul de tetrazolio (MTT) a una concentración de 5 mg.ml^-1. Se incubaron las microplacas durante 2 h a 37^o C. Se realizó un análisis espectrofotométrico con una longitud de onda de 570 nm. A partir de los valores de las densidades ópticas, se determinó la concentración de la droga capaz de reducir la viabilidad celular en un 50 %. La seta A. sylvaticus, a todas las concentraciones probadas, no mostró efectos citotóxicos una vez que la concentración inhibitoria (IC₅₀) obtenida para las células tumorales OSCC-3 fue de 0,06194 mg.ml^-1 y la IC50 comprobada para las células no tumorales NIH3T3 fue de 0,06468 mg.ml^-1. Esta prueba consiguió determinar que la seta A. sylvaticus no posee efectos citotóxicos lo que sugiere un uso seguro para el consumo humano.

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