Abstract

GARFIAS, Y. et al. Características inmunológicas de las células epiteliales limbales: análisis in vitro de la función del TLR4. Arch Soc Esp Oftalmol [online]. 2007, vol.82, n.2, pp.95-102. ISSN 0365-6691.

Objetivo: El objetivo del presente estudio fue determinar la expresión del TLR4 en el epitelio limbo esclero-corneal cultivado in vitro y determinar su función celular después de un estímulo con lipopolisacárido. Métodos: Las células epiteliales limbales fueron obtenidas a partir de rodetes esclero-corneales y se expandieron; las células fueron estimuladas con diferentes dosis de lipopolisacárido de E. Coli y Pseudomonas durante 24 h. Después de la estimulación las células fueron cosechadas e identificadas con anticuerpos contra TLR4 humano y analizadas por citometría de flujo; el mRNA total se obtuvo y se realizó RT-PCR para la identificación de TLR4. La secreción de TNF-alfa fue evaluada por ELISA en el sobrenadante. Resultados: Las células epiteliales limbales expandidas in vitro expresaron constitutivamente la molécula TLR4. Posterior a la estimulación con LPS, la expresión de TLR4 extracelular se aumentó tomando en cuenta la intensidad media de fluorescencia. Cuando se evaluó la expresión de mRNA de TLR4, la densidad aumentó, presentando el máximo de expresión con 10 ng/ml de LPS. Cuando la secreción de TNF-alfa fue evaluada, no se demostró diferencia en la concentración de esta citocina en el sobrenadante de las células estimuladas y las no estimuladas. Conclusiones: Aunque la expresión extracelular de TLR4 en las células epiteliales limbales estimuladas in vitro regula positivamente al TLR4, su función parece no estar asociada a la secreción de TNF-alfa por el epitelio limbal. Tomando en conjunto estos resultados coinciden con los propuestos que el epitelio corneal favorece que la córnea sea un sitio inmunoprivilegiado.

Keywords : Epitelio limbal; TLR4; inmunidad innata; córnea; LPS.

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