Abstract

PARK, Jeong Eun; SCHLEGEL, Hans-Günter; RHIE, Ho Gun  and  LEE, Ho Sa. Sequência nucleotídica e expressão do determinante ncr de resistência à niquel e cobalto em Hafnia alvei 5-5. INT. MICROBIOL. [online]. 2004, vol.7, n.1, pp.27-34. ISSN 1139-6709.

Os genes estruturais de resistência à níquel e cobalto do plasmídeo conjugativo pEJH 501 de Hafnia alvei 5-5, contido em um fragmento SalI-EcoRI de 4800 pares de bases (pb), foram clonados e sequenciados. A sequência de DNA inclue cinco genes na seguinte ordem: ncrA, ncrB, ncrC, ncrY, e ncrX. As sequências de aminoácidos equivalentes à ncrA foram homólogas às sequências de aminoácidos codificadas para nreB em Achromobacter xylosoxidans 31A. A expressão dos genes de ncr mediante o sistema promotor da RNA polimerase T7 permite a Escherichia coli BL21 (DE3) supra-expressar NcrA, NcrB, e NcrC, porém não os genes NcrY e NcrX. Os pesos moleculares aparentes de NcrA, NcrB e NcrC foram 30, 33, e 17 kDa, respectivamente. A análise de extensão de iniciadores mostrou que o mRNA de ncr era iniciado a uma distância de 23 nucleotídeos antes de ncrA. A região promotora do operon de ncr possue uma sequência promotora putativa forte do tipo ð³² na posição -35, e estudos transcricionais de fusão com ´lacZ indicaram que o elemento situado na posição -35 tem influência na transcrição específica ð³².

Keywords : plasmídeo pEJH501; operon NcrABCYX; sequência promotora do tipo ð³²; bactérias resistentes ao níquel.

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