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Sanidad Militar
versão impressa ISSN 1887-8571
Resumo
ORTEGA GARCIA, M.ªV. et al. PCR cuantitativa en tiempo real para la amplificación de ADN de Burkholderia mallei: comparación con el método molecular recomendado por la OIE. Sanid. Mil. [online]. 2017, vol.73, n.2, pp.85-90. ISSN 1887-8571. https://dx.doi.org/10.4321/s1887-85712017000200002.
Objetivo principal:
Comparar dos PCRs en tiempo real cuantitativas para la identificación de Burkholderia mallei, en términos de sensibilidad y especificidad analíticas.
Metodología:
Amplificación parcial de genes de B. mallei:- orf11 y orf13 del sistema de secreción de tipo III TTS1 del género Burkholderia mediante qPCR con sondas de hibridación. - fliP que codifica para la flagelina P de B. mallei mediante qPCR con sonda TaqMan. Cálculo de parámetros de validez.
Resultados:
El ensayo desarrollado en el laboratorio obtuvo un límite de detección del orden del obtenido con el método recomendado por la OIE (70,4 fg/reacción) y permitió la amplificación específica de ADN de B. mallei.
Conclusión:
El método desarrollado por el laboratorio de Biología Molecular del INTA permite una rápida amplificación de ADN de B.mallei con unas elevadas sensibilidad y especificidad analíticas. Además, posibilita la diferenciación entre B. mallei y B. pseudomallei.
Palavras-chave : Muermo; Burkholderia mallei; PCR en tiempo real cuantitativa; Sensibilidad; Especificidad.
