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Archivos de Zootecnia
versão On-line ISSN 1885-4494versão impressa ISSN 0004-0592
Arch. zootec. vol.59 no.228 Córdoba Dez. 2010
Propriedade físico-química da própolis em função da sazonalidade e método de produção
Physicochemical properties of propolis in function of seasonality and production method
Souza, E.A.1, Inoue, H.T.1, Gomes, S.M.A.1, Funari, S.R.C.1 e Orsi, R.O.1*
1Departamento de Produção Animal. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. UNESP. Campus de Botucatu. Botucatu. Distrito de Rubião Júnior, s/n. CEP 18618-000. São Paulo. Brasil. *orsi@fca.unesp.br
RESUMO
O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da sazonalidade sobre algumas características físico-químicas (extrato seco, flavonóides totais, pH e atividade de oxidação) dos extratos alcoólicos (EAP) da própolis obtida mensalmente, durante um ano, por diferentes técnicas (coletor de própolis inteligente, tela plástica e raspagem) em quinze colméias de abelhas Apis mellifera africanizadas. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) nas análises físico-químicas dos EAP, em função da sazonalidade e técnica de produção.
Palavras chave: Apis mellifera Abelhas africanizadas.
SUMMARY
The aim of this work was to investigate monthly, for one year the seasonality effect on the physicochemical properties (dry weight, flavonoids contents, pH and antioxidant activity) of ethanolic extract (EAP) of propolis produced by three different techniques (intelligent propolis collector, plastic screen or scraping) fifteen colonies of africanized bees. No differences (p>0.05) in the physicochemical properties due to the technique of propolis production and seasonality were observed.
Key words: Apis mellifera. Africanized bees.
Introdução
A própolis tem sido utilizada no combate a diversas patologias, sendo amplamente utilizada como antibacteriana, antiviral, antitumoral, antifúngica, antioxidante e imunomoduladora, apresentando muitas outras atividades biológicas (Dobrowolski et al., 1991; Amoros et al., 1992; Sforcin et al., 2000; Castro, 2001; Fernandes Jr. et al., 2005; Gonsales et al., 2005a; Orsi et al., 2005; Orsi et al., 2006).
Entretanto, diversos fatores podem interferir na qualidade da própolis, como sazonalidade e tipo de coletor utilizado (Lima, 2006). No Brasil, para assegurar a qualidade do produto, utilizam-se as normas do Regulamento Técnico de Identidade e Qualidade da Própolis (MAPA, 2001), para o extrato alcoólico de própolis: extrato seco (>11% m/v), compostos fenólicos (>0,50% m/m), flavonóides (>0,25% m/m), atividade antioxidante (<22 segundos), entre outros.
Considerando-se que a procura pela própolis tem crescido nos últimos anos, principalmente pelo interesse da população para os chamados produtos naturais, o levantamento de dados que contribuam para o conhecimento de fatores que possam interferir com a qualidade do produto, são de suma importância.
Diante do exposto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da sazonalidade sobre algumas características físico-químicas (extrato seco, flavonóides totais, pH e atividade de oxidação) dos extratos alcoólicos (EAP) da própolis obtida por diferentes técnicas de produção (coletor de própolis inteligente, tela plástica e raspagem).
Material e métodos
As amostras de própolis foram pro-duzidas no apiário da Área de Produção de Apicultura da fazenda Experimental La-geado, UNESP, Campus de Botucatu, com as seguintes coordenadas geográficas: 22o 49' de latitude Sul e 48o 24' de longitude Oeste e altitude média de 623 metros.
Foram utilizadas quinze colméias de abelhas Apis mellifera africanizadas, alojadas em colméias padrão Langstroth, pintadas externamente, distribuídas ao acaso e manejadas apenas para a produção de própolis, sendo que no período de chuvas foi necessária a realização de alimentação artificial (água e açúcar na proporção de 1: 1). Antes do início do experimento as colônias foram homogeneizadas em relação às áreas de cria e de alimento (pólen e mel).
Foram selecionadas, ao acaso, cinco colméias para cada técnica de produção utilizada (coletor de própolis inteligente, tela plástica e raspagem). A produção de própolis foi avaliada no período de maio de 2005 a abril de 2006. Mensalmente, os coletores foram remanejados entre as colméias do apiário, por meio de sorteio casualizado.
As variáveis climáticas, no período de estudo, foram fornecidas pelo Departamento de Ciências Naturais, Faculdade de Ciências Agronômicas, UNESP.
Para o preparo dos extratos alcoólicos de própolis (EAP), toda a própolis produzida mensalmente, pela mesma técnica de produção, foi misturada e mantida em freezer. Após congelada, a própolis foi triturada e os EAP foram preparados na proporção de 30% (em álcool etílico 70%). As soluções permaneceram ao abrigo da luz, sob agitação freqüente, durante sete dias. Decorrido este período, as soluções foram filtradas e os EAP obtidos para as análises físico-químicas (Orsi et al., 2000).
As análises físico-químicas foram realizadas da Área de Produção de Apicultura do Departamento de Produção Animal da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP.
O extrato seco foi determinado segundo metodologia descrita em Cunha et al. (2004). Para isto, as amostras de EAP foram mantidas sob refrigeração durante 24 horas, colocadas em béquer previamente pesado e mantidas em estufa a 105o C, durante 2 horas, sendo em seguida determinado o teor de extrato seco.
O teor de flavonóides em quercetina foi determinado por ensaio espectrofotométrico a 425 nm, segundo metodologia descrita por Popova et al. (2003), utilizando-se cloreto de alumínio (AlCl3) em metanol absoluto. Para o preparo do padrão, utilizou-se quercetina em diferentes concentrações.
Para a determinação do pH do EAP, foi utilizado um pHmêtro digital modelo Tecnopon mPA 210. Para isto, 50 ml do EAP são colocados em béquer e levados em contato com o leitor do aparelho. O pH foi registrado após estabilização. Para padro-nização do pHmêtro são realizadas leituras dos tampões com pH 4,0 e 7,0, conforme estabelecido na Farmacopéia Brasileira (1998).
Foi determinada a atividade de oxidação segundo metodologia descrita na Farma-copéia Brasileira (1998), utilizando-se permanganato de potássio (KMnO4) como agente oxidante. O tempo de reação foi determinado com o auxílio de um cronômetro.
Os resultados foram comparados por ANOVA, seguida do teste de Tukey para verificar diferenças entre as médias. Foi considerado como estatisticamente diferentes quando p<0,05 (Zar, 1996).
Resultados e discussão
As variáveis climáticas analisadas, durante o período experimental, não apre-sentaram diferenças estatísticas significativas entre as estações do ano, com temperatura média de 19,8±1,6o C, pluviometria de 3,7±2,5 mm, umidade relativa de 53,4±4,1%, insolação de 6,6±1,3 horas e velocidade do vento de 90,6±19,9 km/dia.
As caracteristicas médias dos extratos alcoólicos da própolis, estão apresentados na tabela I e tabela II encontram-se em função da sazonalidade.
Com relação ao teor de extrato seco do EAP, verifica-se que não houve diferença significativa entre a própolis produzida pela técnica do CPI, tela plástica e raspagem (tabela I). Avaliando-se o efeito da sazonalidade sobre o teor de extrato seco (%) presente nos EAPs, observa-se que não houve diferença significativa entre as estações do ano e os métodos de produção de própolis testados. Entretanto, pode-se observar que a própolis produzida no verão tende a apresentar maior porcentagem de extrato seco em comparação com as demais estações do ano, independente da técnica de produção utilizada (CPI, tela ou raspagem) (tabela II).
Verifica-se (tabela II) que o EAP produzido com a própolis de tela plástica e raspagem, no período do inverno, apre-sentou teor de extrato seco abaixo do valor mínimo (11%) permitido pela legislação do Brasil (MAPA, 2001) (tabela II).
Lima (2006) cita que a produção de própolis deve ser evitada pelo apicultor no período do inverno, no sentido de poder prejudicar o enxame, apresentar perdas consideráveis de produção e menor quali-dade do produto.
Park et al. (2000) encontraram valores na faixa de 54,0% e 65,0% para amostras provenientes da região Sudeste do Brasil e, Sato (2003) obteve valores de extrato seco variando de 1,36% em uma amostra de própolis do estado do Paraná até 95,29% em uma amostra do estado de São Paulo. Gonsales et al. (2005b) encontraram valores de extrato seco, para amostras de própolis do estado de São Paulo, variando entre 8,05% a 16,87%.
Com relação ao teor de flavonóides totais (%) presente no EAP das própolis obtidas por CPI, tela plástica e raspagem, no período estudado, não se observou diferença significativa entre eles (tabela I), embora o CPI tenha apresentado maior porcentagem de flavonóides (1,17±1,87%), em comparação com a tela plástica (0,30±0,12%) e raspagem (0,42±0,04%). Observa-se que não houve diferença significativa entre as estações do ano e o método de produção de própolis (tabela II).
Segundo o MAPA (2001), os valores mínimos para flavonóides totais no EAP são de 0,25% m/m. Desta forma, pode-se verificar que todas as amostras de EAP encon-tram-se dentro dos valores estabelecidos na legislação, sugerindo que a sazonalidade e a técnica de produção utilizada não interferiram com esta característica físico-química.
Massuda (2003) obteve valores de flavonóides para amostras de extrato alcoólico de própolis na faixa de 0,53% a 1,49% e, Sato (2003) observou variação de 0,0% a 7,04% em amostras de própolis de diferentes regiões brasileiras. Da mesma forma, Marcucci et al. (1998) encontraram valores baixos de flavonóides em amostras de própolis brasileiras (0,83% e 0,84%, respectivamente). Também Thomás-Barberán et al. (1993) observaram baixos valores de flavonóides em amostras de própolis da Venezuela. Kumazawa et al. (2004) encon-traram teores de flavonóides em amostras de própolis do Brasil de 0,05%. Silva et al. (2006) encontraram valores de flavonóides totais 0,19 a 0,38% em amostras de própolis do Estado da Paraíba. Sousa et al. (2007) verificaram o teor de flavonóides totais em amostras de própolis provenientes do Estado de São Paulo (região de Franca) e Minas Gerais (região de Passo). Os autores encontraram valores de 0,38±0,06% para São Paulo e entre 0,12 a 2,11% para a própolis de Minas Gerais.
Por outro lado, Kujumgiev et al. (1999) encontrou altos teores de flavonóides (42%) na própolis da Bulgária. Estes resultados estão de acordo com Bracho et al. (1996) e Gonzáles e Bernal (1997), afirmaram que a própolis produzida nos trópicos é pobre em flavonóides.
A composição química da própolis depende da vegetação disponível ao redor do apiário para coleta de resina pelas abelhas (Koo e Park, 1997). Devido às diferenças geográficas, amostras de própolis provenientes da Europa contêm maiores teores de flavonóides e ésteres de ácidos fenólicos (Bankova et al., 2000). Diferentemente, os maiores componentes das própolis brasi-leiras são terpenóides e derivados prenilados do ácido p-cumárico (Marcucci e Bankova, 1999).
Não se verificou diferença estatística para o pH e atividade de oxidação das amostras de EAP da própolis proveniente dos diferentes métodos de produção (CPI, tela plástica e raspagem), no período estudado (tabela I) nem entre as estações do ano e o método de produção de própolis (tabela II).
Sato (2003) encontrou valores de pH para amostras de EAP variando de 3,0 a 5,7, demonstrando que o pH do extrato de própolis tende a ser ligeiramente ácido. Gonsales et al. (2005b) encontraram valores de pH para EAP variando de 4,0 a 6,0.
Pode-se observar que todas as amostras de EAP encontram-se dentro dos limites estabelecidos (tempo máximo 22 segundos) pela legislação (MAPA, 2001).
Maldonado (2000) encontrou para a própolis Argentina valores de atividade antioxidante variando entre 1,6 segundos a 120,0 segundos. Garcia et al. (2000) analisaram amostras de própolis coletadas no Estado do Paraná, no período do inverno e verão. Estes autores encontraram teores de flavonóides variando de 0,27% a 0,38% para a estação do inverno e de 0,19% a 0,52% para o verão.
Gonsales et al. (2005b) encontraram, para amostras de própolis do Estado de São Paulo, propriedade antioxidante variando de 5 segundos a 252 segundos. Silva et al. (2006) encontraram valores de flavonóides variando de 0,19% a 0,52% para amostras de própolis produzidas no Estado da Paraíba.
Conclusões
De acordo com os resultados obtidos pode-se concluir que as propriedades físico-químicas analisadas, para os extratos alcoólicos de própolis, não foram influenciadas pelo tipo de coletor utilizado para a produção de própolis (coletor de própolis inteligente, tela plástica e raspagem) e pela sazonalidade.
Agradecimentos
À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESP.
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Recibido: 2-10-08.
Aceptado: 5-3-09.