Prevalencia de la mutación C677T del gen de la metilentetrahidrofolato reductasa en pacientes con patología isquémica cerebrovascular aguda en la Comunidad Autónoma Aragonesa

Prevalence of methylenetetrahydrofolate reductase C677T mutation among patients with acute ischemic cerebrovascular disease in Aragon

 

 

B. Sánchez-Marín, J. M. Grasa^1,4, M. Torres¹, M. T. Calvo², B. Martínez-Jarreta³, J. A. García-Erce¹, M. Giralt¹

Servicios de Neurología, ¹Hematología y Hemoterapia y ²Genética. Hospital Universitario Miguel Servet. ³Laboratorio de Genética Forense. Departamento de Medicina Legal y Toxicología. ⁴Departamento de Microbiología, Epidemiología y Salud Pública. Universidad de Zaragoza

Este trabajo es el resultado del proyecto presentado en el VIII Curso de Enfermedades Cerebrovasculares para Médicos Residentes de Neurología. Ha sido financiado parcialmente por la beca CONSID PO49/99.

Dirección para correspondencia

 

 

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RESUMEN

Fundamentos: La mutación C677T de la metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) es la principal causa de hiperhomocisteinemia moderada en nuestro medio. La hiperhomocisteinemia es un factor reconocido de riesgo para aterotrombosis. Los pacientes con la mutación MTHFR C677T padecen hiperhomocisteinemia moderada en situaciones de carencia de folatos.
Métodos: Se revisaron retrospectivamente resultados de los estudios de la mutación C677T MTHFR en pacientes con accidentes cerebrovasculares isquémicos agudos (ACVA) menores de 50 años y mayores de 50 años sin factores clásicos de riesgo vascular o historia familiar o personal sugerente de trombofilia, en un periodo de 3 años. Se realizaron estudios de la misma mutación en 90 donantes de sangre voluntarios sanos, como grupo control. Se realizó estadística descriptiva en base de datos informatizada.
Resultados: Se recogieron muestras de 99 pacientes y de 90 controles. Edad media: 44,3 con desviación estándar de 13,9 años en pacientes y 39,1 con DS de 8,3 años en controles. Encontramos 19 (19,19%) homocigosis MTHFR C677T en el grupo de pacientes y 14 (15,55%) en el grupo de controles .
Conclusiones: La homocigosis MTHFR C667T es más frecuente en el grupo de pacientes con ACVA que en los controles, si bien no encontramos diferencias significativas. Sin embargo, sugerimos que, dada la alta prevalencia poblacional encontrada en nuestro medio para la mutación MTHFR C677T, su estudio debe realizarse dentro de los estudios de trombofilia, pues es capaz de identificar pacientes con un factor de riesgo reversible mediante la administración de folatos.

Palabras clave: Homocisteína. Ictus. Trombofilia. MTHFR. Folatos.

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ABSTRACT

Background: Mutation C677T of the methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) is the main cause of mild hyperhomocysteinemia. Hyperhomocysteinemia is a recognized risk factor for aterothrombosis. MTHFR C677T patients have higher levels of homocysteine in absence of dietary folates.
Methods: Retrospective study over data from patients studied for MTHFR C677T diagnosed of ischemic stroke (IS) younger 50 or older 50 without classic vascular risk factors or with familiar or personal history suggesting thrombophilia in a period of 3 years. MTHFR C677T was screened in 90 healthy blood donors as a control group. Computer database was used for descriptive statistics.
Results: Blood simples from 99 patients and from 90 donors (control). Mean age: 44.3 with Standard desviation (SD) 13.9 years in IS group and 39.1 with SD 8.3 years in control group. We found 19 (19.19%) homozygotes for MTHFR C677T in IS group and 14 (15.55%) in control group.
Conclusions: Homozygosis for MTHFR C667T is more frequent in the IS group than in the control one, although there is no significant differences. Anyway, we suggest that, because of the high prevalence of the mutation MTHFR C677T found, screening should be made in the thombophilia studies, so that we could find patients with a risk factor that could be lowered by folates in the diet.

Key words: Homocystein. Stroke. Thrombofilia. MTHFR. Folate.

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Introducción

Se han descrito la importancia de la hiperhomocisteinemia como factor de riesgo vascular en general y de accidente cerebrovascular agudo en particular (1-10). La etiología de la hiperhomocisteinemia es muy variada, provocándose niveles altos de homocisteina en sangre en la insuficiencia renal crónica, insuficiencia hepática, desnutrición, toma de anticonceptivos orales, mutaciones en la Cistation beta sintetasa, antiepilépticos, L-dopa y fármacos que interfieren las vías metabólicas de los folatos, tabaquismo, etc. (11-15). Incluso se han observado diferencias en función del sexo, siendo mayor la homocisteinemia en varones (16-18). No obstante, en la población general, es mucho más frecuente encontrar sujetos con homocisteina débil o moderadamente elevada, sin padecer ninguna de las circunstancias ya descritas. La principal causa de hiperhomocisteinemia moderada en nuestro medio es una mutación en la posición 677 de gen de la 5,10-metilentetrahidrofolato redutasa (MTHFR), que consiste en un cambio de citosina (C) por timidina (T) a nivel genómico y por consiguiente un cambio de alanina por valina a nivel proteico (19). El 73 % de pacientes con homocisteína superior a 40 mcmol/L son homocigotos para C677T MTHFR (20). La prevalencia de homocigotos para esta mutación en población europea oscila entre el 5 y el 15%. La mutación C677T de la MTHFR provoca una variedad termolábil de dicha enzima que, en los sujetos homocigotos (genotipo TT), muestra una reducción cercana al 50% en la capacidad de donar grupos metilo a la enzima metionina sintetasa (21), con lo que disminuye la velocidad de conversión de homocisteína hacia metionina, elevándose los niveles de homocisteína.

El estudio que presentamos pretende determinar la prevalencia del alelo T en posición 677 del gen de la MTHFR en pacientes con ACVA jóvenes o mayores de 50 años con ausencia de factores de riesgo clásicos, y en un grupo de donantes de sangre sanos.

 

Material y métodos

Pacientes. Se realizó estudio genético para la mutación C677T MTHFR en pacientes diagnosticados de ACVA que se refirireron para estudio de trombofilia hereditaria y adquirida, dentro de la rutina diagnóstica habitual del hospital terciario que atiende las áreas 2 y 5 de salud de la comunidad autónoma aragonesa. Rutinariamente se refieren a estudio de trombofilia los pacientes con ACVA menores de 50 años y mayores de 50 años sin factores de riesgo vascular (tabaquismo, hipertensión arterial, arritmias embolígenas, diabetes mellitus, hiperlipemia). Retrospectivamente, y a partir de los registros de los estudios de de trombofilia hereditaria y adquirida desde octubre de 1998 a mayo de 2001, se revisaron las historias clínicas de los pacientes enviados a estudio con diagnóstico confirmado de ACVA de manera consecutiva en el periodo de tiempo referido, y se analizaron edad y sexo.

Controles. Se realizó estudio en donantes de sangre voluntarios y altruistas consecutivos que acudieron al banco hospitalario de sangre, previo consentimiento informado enviado al comité de ética del hospital.

Recogida de especímenes. Se recogieron muestras de sangre en tubos que contenían EDTA tripotásico para extracción de ADN por medios convencionales, al menos tres meses tras el evento isquémico agudo en el caso de los pacientes, y en el momento de la donación altruista de sangre en el caso de los controles. Estos últimos rellenaron un cuestionario y un consentimiento informado.

Determinaciones laboratoriales. Se realizaron PCR-RFLP para detección de C677T MTHFR según procedimientos previamente descritos (19).

Se realizó estadística descriptiva en base de datos informatizada.

 

Resultados

Se recogieron muestras de 99 pacientes (M/F: 44/55). La edad media fue de 44,3 años con una desviación estándar (DS) de 13,9 años (IC95%: 16,5-72,1). Se recogieron muestras de 90 donantes altruistas de sangre (M/F: 51/39) con edad media de 39,1 años y DS de 8,3 años (IC95%: 22,5-55,7).

En el grupo de pacientes encontramos 19 homocigosis TT (variedad mutante), 52 heterocigotos (CT) y 28 homocigotos CC (variedad silvestre). En el grupo de controles encontramos 14 homocigosis TT (variedad mutante), 43 heterocigotos (CT) y 33 homocigotos CC (variedad silvestre). En la tabla I se describen los datos epidemiológicos de ambos grupos.

 

Discusión

Encontramos una elevada frecuencia alélica de la variedad mutada en pacientes (0,45) con un 19,19% de homocigotos, si bien en donantes sanos la incidencia de homocigotos (15,55%) y la frecuencia alélica (0,39) también son elevadas. Parece que la frecuencia alélica es superior en el grupo de pacientes que en el de controles, pero la significación estadística no es valorable, pues al encontrar una prevalencia tan alta en población sana, el tamaño de la muestra necesario para establecer conclusiones es muy elevado, y excede las ambiciones de este estudio. Los resultados encontrados en la serie de controles hacen que estimemos una alta prevalencia poblacional del polimorfismo T en posición 677 del gen de la MTHFR en la población sometida a estudio. La prevalencia descrita se encuentra entre las más altas descritas en el continente europeo, sin embargo el territorio aragonés tiene una de las tasas más bajas de Europa en mortalidad cardiovascular. Probablemente las interacciones ambientales y lo que se denomina "dieta mediterránea" son capaces de modular la tendencia genética, más o menos intensa, que mutaciones de este tipo otorgan (22). La "americanización" de la dieta puede ser un factor determinante para que en muchos individuos el potencial aterogénico de C677T MTHFR se manifieste. Recordemos que muchos paises con patrones dietéticos pobres en aporte de verdura y fruta (y por tanto, deficitarios en folatos) han adoptado medidas como el enriquecimiento de productos básicos con folatos.

Hay que tener en cuenta que la MTHFR es una enzima dependiente de flavin-adenina dinucleótido (FAD) que cataliza la conversión de 5,10-metilenterahidrofolato en 5-metiltetrahidrofolato de manera irreversible. La mutación C677T crea una variedad termolábil de la enzima con menor capacidad en la transferencia de un grupo metilo para la remetilación de la homocisteina para su conversión a metionina por medio de la enzima metionina sintetasa, que requiere vitamina B12 (cobalamina) como cofactor (12). Diversos trabajos sugieren que la actividad de MTHFR en la mayoría de los tejidos alcanza niveles suficientes para el normal metabolismo en pacientes con un adecuado aporte de folatos en la dieta (23,24). Como consecuencia de ello, en pacientes con genotipo TT, los niveles de homocisteina disminuyen con aportes diarios en la dieta de 0,5 a 2 mg de ácido fólico (25).

Es difícil llegar a conclusiones claras con respecto a esta mutación dada la gran cantidad de factores dietéticos que pueden influir en la expresión de la hiperhomocisteinemia provocada o favorecida por dicha mutación (26). Es muy posible que la variabilidad de conclusiones a las que están llegando numerosos estudios sobre la MTHFR C677T como factor de riesgo independiente de enfermedad aterotrombótica exprese el diferente aporte en la dieta de folatos y vitaminas de grupo B según la localización geográfica y aspectos socioculturales. No obstante, el conocimiento de este aspecto genético en un individuo que, sin factores de riesgo clásicos, desarrolla ACVA, puede aportar posibilidades profilácticas con folatos sobre un "nuevo" factor de riesgo, la homocisteína.

 

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Dirección para correspondencia:
José María Grasa Ullrich
C/ Bolonia,7-9, casa 4,1-B.
50008 Zaragoza
E-mail: josemgrasa@eresma.com

Trabajo aceptado: 3 de noviembre de 2005