ORIGINAL / Investigación animal

 

Epitope-based vaccine for the treatment of Der f 3 allergy

Vacuna basada en epítopo para el tratamiento de la alergia Der f 3

 

 

Xiaodong Zhan^1,2, Chaopin Li¹, Yuxin Jiang¹ and Na Li¹

¹Deparment of Medical Parasitology, Wannan Medical College, Wuhu 241002, Anhui, People's Republic of China.
²College of life science, Anhui Normal University, Wuhu 241002, Anhui, People's Republic of China.

 

 

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ABSTRACT

Introduction: mites allergic asthma is caused by exposure to home dust mite (HDM). Der f 3 is believed to be one of the major allergens in mites allergic asthma. The work was to identify the immune characteristics of Der f 3 epitope-based vaccine containing T cell and B cell epitopes.
Methods: T cell lines were generated from peripheral blood mononuclear cells of Der f 3 allergic patients. Three T cell epitopes and five B cell epitopes of Der f 3, which we identified previously, were selected to design a polypeptide (named Der f3-peptides). DNA constructions encoding these Der f 3-peptides were expressed in Escherichia coli. The T cell lines were stimulated with the peptides and tested for proliferative capacity and cytokine production.
Results: plasmid pET28a (+)-Der f 3-peptides was constructed and expressed in E. coli BL21, and the Der f3-peptides protein was purified and confirmed by Western blotting. The Der f 3-peptides were recognized by the T cell clones from allergic patients. SI value of Der f 3 group and Der f 3-peptides group were both higher than that of PBS group (P<0.05). The Der f 3 and Der f 3 peptides induced secretions of IL-4 and IL-5 were decreased compared with that of PBS group (P<0.05). The capacity of IgE-binding to Der f 3-peptides (41.25±5.67) µg/ml was decreased dramatically compared with that of Der f 3 (83.60 ± 10.92) µg/ml (P < 0.05).
Conclusions: our results demonstrate that several major T cell epitopes and B cell epitopes of Der f 3 can be valuable for designing the peptide-based immunotherapeutics for the mites allergic asthma.

Key words: Antigens. Dermatophagoides. Cytokines. Epitopes. T-lymphocyte. Immunotherapy.

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RESUMEN

Introducción: el asma alérgica esta causada por la exposición a los ácaros del polvo casero (HDM). Der f 3 se cree que es uno de los principales alérgenos en los ácaros del asma alérgica. El trabajo consistió en identificar las características inmunológicas de la vacuna basada en epitopo-Der f 3 que contienen las células T y las células B.
Metodos: se generaron líneas de células T a partir de células mononucleares de sangre periférica de pacientes alergicos a Der f 3. Tres epítopos de células T y cinco epítopos de células B de Der f 3, que hemos identificado previamente, fueron seleccionados para diseñar un polipéptido (denominados péptidos Der f 3). Construcciones de DNA que codifican estos péptidos Der f 3 se expresaron en Escherichia coli. Las líneas de células T se estimularon con los péptidos y se utilizaron en el ensayo por su capacidad proliferativa y la producción de citoquinas.
Resultados: el plasmido pET28a (+) - Der f 3-péptidos se construyo y se expresaron en E. coli BL21, y la proteina de Der f 3-péptidos se purificó y se confirmaron mediante transferencia de Western. Los Der f 3-péptidos fueron reconocidos por los clones de células T procedentes de pacientes alérgicos. Valor SI de Der f 3 grupo y f grupo 3-péptidos Der eran tanto mayor que la del grupo de PBS (P <0, 05). El Der f 3 y Der f 3 péptidos indujeron secreciones de IL-4 e IL-5 se redujeron en comparación con la del grupo PBS (P <0,05). La capacidad de unión a IgE a Der f 3-péptidos (41, 25 ± 5, 67) µg/ml se redujo drasticamente en comparación con el de Der f 3 (83,60 ± 10,92) µg/ml (P <0,05).
Conclusiones: nuestros resultados demuestran que varios de los principales epítopos de células T y de células B de Der f 3 pueden ser valiosos para el diseño de agentes inmunoterapéuticos basados en péptidos para los ácaros del asma alérgica.

Palabras clave: Antígenos. Dermatofagoides. Citoquinas. Epítopos. Linfocitos-T. Inmunoterapia.

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http://scielo.isciii.es/pdf/nh/v32n6/54originalinvestigacionanimal01.pdf